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目的：评价血浆CMV-DNA实时荧光定量PCR用于成人异基因移植患者活动性CMV感染的诊断监测和指导治疗的临床意义,并分析影响发病及治疗效果的因素；同时,统计恶性血液病患者并发侵袭性曲霉菌感染的临床特征,建立曲霉菌实时荧光定量PCR诊断方法并用于临床检测,探讨RQ-PCR对IA的早期诊断价值。病例与方法：回顾性研究2008年1月至2010年6月在我院血液科行异基因造血干细胞移植的成人患者141例,调取病例资料及CMV检测数据并随访至移植后180天,分析患者特征、RQ-PCR检测结果、CMV感染及治疗情况和相关危险因素。提取曲霉菌、念珠菌和细菌菌株基因组DNA进行曲霉菌RQ-PCR检测验证曲霉菌目的片段的可靠性,构建重组质粒、制备RQ-PCR标准品、绘制标准曲线并对菌株DNA进行定量检测；采集2010年9月至2011年1月恶性血液病发热患者EDTA抗凝外周血并从血浆、全血中提取真菌基因组DNA行曲霉菌RQ-PCR检测并进行ROC诊断分析,并同时收集病例资料进行IA诊断评估,综合PCR检测结果与临床统计结果,确定诊断界值。结果：141例HSCT患者中CMV感染和CMV肺炎发生率为81.5%和2.9%。血浆CMV-DNA阳性的中位时间为移植后33天。HSCT后第一月、第二月、第三月及三个月以后CMV感染发生率分别为34.0%、66.7%、9.7%、7.1%(P=0.000)。女性、预处理中使用ATG或巴利昔单抗以及发生急性GVHD的患者更容易感染CMV(90.4％vs 76.4％,P=0.044；88.0％vs 74.2％,P=0.049；100％vs 73.4％,P=0.043)。使用ATG或巴利昔单抗以及发生急性GVHD的患者中移植后CMV感染/CMV肺炎发生的时间更早(中位时间：28天vs 39天,P=0.007；33天vs 46天,P=0.000)。所有HSCT患者移植前均常规接受更昔洛韦预防抗病毒治疗,发生CMV感染后63例患者接受单药GCV、6例接受单药膦甲酸钠抢先抗病毒治疗,治疗的总有效率为87.8%,急性GVHD.病毒DNA最大负荷量、阳性次数及治疗疗程与疗效有关。16株曲霉菌28S-ITS2特异性目的片段RQ-PCR结果15株阳性,24株念珠菌、10株细菌均阴性。曲霉菌RQ-PCR方法可靠、稳定,在菌株中诊断的敏感性、特异性分别为93.75%和100%。全血标本曲霉菌RQ-PCR拷贝数显著大于血浆标本(P=0.000)。以单次RQ-PCR拷贝数<10 copies/μl为阴性,10-20 copies/μl为可疑阳性,≧20 copies/μl为阳性,且两次可疑阳性诊断为阳性。以单次≧20copies/μl为阳性,28S-ITS2 RQ-PCR诊断IA的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为90%、68%、77%、85%。RQ-PCR阳性结果较肺CT出现曲霉菌感染征象及培养提示曲霉菌感染提前的平均天数分别为6天和11天。结论：应用实时荧光定量PCR检测血浆CMV-DNA监测异基因造血干细胞移植患者CMV感染情况并指导抢先抗病毒治疗,可以实现早期诊断、及时治疗,显著降低CMV肺炎发生率,明显改善患者预后,具有重要的临床意义。女性患者、预处理方案中使用ATG或CD25单抗、急性GVHD、病毒DNA最大负荷量、DNA阳性次数等是影响CMV感染发生及抗病毒疗效的危险因素。全血标本曲霉菌实时荧光定量PCR诊断恶性血液病患者侵袭性曲霉菌感染敏感性高,特异性好,可以实现早期诊断,具有重要的临床应用前景。