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目的：
从细胞粘附分子的蛋白表达及氧化损伤相关指标含量变化的角度，观察苦碟子注射液对人脑微血管内皮细胞的影响，探讨中风病“毒损脑络”病机假说的现代生物学内涵。
方法：
1、人脑微血管内皮细胞(HBMEC)的培养：经过对HBMEC的复苏、培养、传代，建立稳定的细胞实验平台。
2、不同浓度高糖培养基对正常培养的HBMEC活性影响实验：通过MTT法观察HBMEC在不同浓度高糖培养基中的存活变化，初步建立体外HBMEC损伤模型。
3、苦碟子注射液对正常培养的HBMEC的细胞增殖实验：通过MTT法检测细胞活性变化，观察正常培养下的HBMEC经不同浓度、不同时间的苦碟子注射液处理后细胞的增殖情况，以确定安全有效的实验用药浓度。
4、苦碟子注射液对HBMEC高糖损伤后ICAM—1、VCAM—1蛋白表达的影响：以免疫细胞化学染色法观察ICAM—1和VCAM—1蛋白表达的变化。
5、苦碟子注射液对HBMEC高糖损伤后NF—κB蛋白表达的影响：以免疫细胞化学染色法观察NF—κB活化时蛋白表达的变化。
6、苦碟子注射液对HBMEC高糖损伤后NO、MDA、SOD含量变化的影响：以NO、SOD、MDA测定试剂盒测定三者的含量变化。
7、高血压病人(中危和高危)高糖血清对体外培养正常人脑微血管内皮细胞活性的影响：通过MTT法检测细胞活性变化。
结果：
1、复苏后的HBMEC胞体肥厚、透明，呈菱形或多角形，核小而圆，细胞单层生长，呈铺路石样，符合内皮细胞的特征。
2、同一时间点高糖组与正常对照组相比较，高糖组细胞的存活率明显下降(P<0.01)，随作用时间的延长，高糖组虽然对HBMEC的增殖有一定的促进效应，但在各时间点与正常对照组相比仍然有显著地抑制作用(P<0.01)。
3、经苦碟子注射液干预24h、72h后确定10％、5％、2.5％浓度组是较为理想的保护浓度。
4、苦碟子注射液各浓度组均可明显抑制高糖损伤后ICAM—1、VCAM—1的蛋白表达(P<0.05，P<0.01)。
5、苦碟子注射液各浓度组均可明显抑制高糖损伤后NF—κB的蛋白表达(P<0.05，P<0.01)。
6、苦碟子注射液各浓度组均可明显抑制高糖损伤后SOD的活性(P<0.01)，增加NO(P<0.01)及MDA(P<0.01)的表达。
7、高血压病人(中危和高危)组高糖血清对HBMEC活性有明显的抑制作用(P<0.01)。
结论：
1、高糖环境可抑制正常培养状态下HBMEC的增殖。
2、苦碟子注射液在一定浓度范围之内可促进正常培养状态下HBMEC的增殖。
3、苦碟子注射液可降低ICAM—1、VCAM—1的蛋白表达。
4、苦碟子注射液可明显减少NF—κB的转核活化，并有效降低NF—κB的蛋白表达。
5、苦碟子注射液可明显增强SOD的活力，并有效降低NO、MDA的表达。
6、高血压病人(中危和高危)组高糖血清可抑制正常培养状态下HBMEC的增殖。
通过此次的研究发现，在高糖损伤的过程中，苦碟子注射液通过抑制NF—κB信号通路，从而减少粘附分子的过表达，影响氧化损伤相关指标的含量变化，减轻炎症反应。这一结果为依据“毒损脑络”病机假说所提治法在临床应用提供了生物学佐证，也从更深层次上反映了“毒损脑络”病机假说的生物学内涵。