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目的:
主要从心肌组织胶原表达及胶原代谢的角度观察益母草水煎剂对实验性大鼠心肌重构的影响。为益母草的临床新应用提供实验依据。
方法:
1.SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素建立心肌重构模型，随机分为5组，分别为正常组、模型组、依那普利组、益母草小剂量组和益母草大剂量组，药物干预15周。
2.心导管法检测大鼠心脏血流动力学指标，包括:左室收缩峰压(LVSP)、左室舒张未压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)；
3.热稀释法检测大鼠心输出量(CO)；
4.称取重量观察大鼠心脏质量系数(HW/BW)、左室质量系数(LVW/BW)；
5.石蜡切片HE染色观察大鼠心肌组织形态学:
6.酶联免疫吸附实验检测大鼠血清神经内分泌-细胞因子，包括:去甲肾上腺素(NE)、血管紧张素II(Angll)、心房利钠肽(ANP)、B型利钠肽(BNP)；
7.碱性水解法检测大鼠心肌羟脯氨酸含量，免疫组化法观察大鼠心肌组织I、III型胶原含量；
8.明胶酶谱法检测大鼠心肌组织基质金属蛋白酶2(MMP2)活性，western blot法检测大鼠心肌组织MMP2蛋白表达量，RT-PCR检测大鼠心肌组织MMP2mRNA表达量。
9.Western blot法检测大鼠心肌组织基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)蛋白表达量，RT-PCR检测大鼠心肌组织TIMP2 mRNA表达量。
结果:
1.与正常组相比，异丙肾上腺素造模15周后能引起大鼠心功能(LVSP、±dp/dtmax、CO)下降(p<0.05)。与模型组相比，依那普利和益母草水煎剂大剂量能改善LVSP、+dp/dtmax和CO(p<0.05)，依那普利和益母草小剂量能改善-dp/dtmax(p<0.05)。
2.与正常组相比，异丙肾上腺素造模15周后大鼠心脏质量系数和左室质量系数明显升高(p<0.05)。与模型组相比，依那普利和益母草水煎剂小剂量能明显改善大鼠心脏质量系数和左室质量系数(p<0.05)。
3.异丙肾上腺素造模15周大鼠心肌组织呈现明显纤维化，间质加宽，纤维细胞、成纤维细胞、炎症细胞增多，残存心肌细胞肥大或胞浆淡染。依那普利和益母草水煎剂小剂量组能显著改善上述病理改变。
4.与正常组相比，异丙肾上腺素造模15周后大鼠血清NE、ANP、BNP含量明显升高(p<0.05)。与模型组组相比，依那普利组能下调大鼠血清NE、AngII、ANP、BNP含量(p<0.05)；益母草水煎剂大小剂量能下调大鼠血清BNP含量(p<0.05)。
5.与正常组相比，异丙肾上腺素造模15周后大鼠心肌组织羟脯氨酸含量显著升高(p<0.05)。与模型组相比依那普利和益母草小剂量能显著减少大鼠心肌组织羟脯氨酸含量(p<0.05)。
6.与正常组相比，异丙肾上腺素造模15周后大鼠心肌组织I、III型胶原含量显著升高(p<0.05)，I/III型胶原比显著升高(p<0.05)。与模型组相比，依那普利和益母草水煎剂小剂量能减少大鼠心肌组织I、III型胶原含量(p<0.05)及降低I/III型胶原比(p<0.05)。
7.与正常组相比，异丙肾上腺素造模15周后大鼠心肌组织MMP2蛋白、mRNA表达显著上调(p<0.05)，活性显著升高(p<0.05)。与模型组相比依那普利和益母草水煎剂小剂量能显著下调MMP2蛋白、mRNA表达(p<0.05)，并抑制其活性(p<0.05)。
8.与正常组相比异丙肾上腺素造模15周后大鼠心肌组织TIMP2蛋白表达显著
下调(p<0.05)，依那普利和益母草水煎剂小剂量能上调其表达(p<0.05)。
结论:
1.大剂量益母草水煎剂能改善ISO致大鼠心肌重构模型心脏收缩功能。
2.小剂量益母草水煎剂能改善ISO致大鼠心肌重构模型舒张功能，减轻心肌重构程度。
3.小剂量益母草水煎剂能改善ISO致大鼠心肌胶原重构，下调胶原表达，改善心肌胶原构成比。该作用至少部分与MMP-2途径有关。