三七根及花总皂苷抗乳腺癌侵袭的实验研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyaping121416
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目的   分别从体外、体内实验考察三七根及花总皂苷对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和乳腺癌裸鼠侵袭能力的影响,探讨三七根及花总皂苷抗肿瘤侵袭的机制。   方法   1、体外实验:MTT实验检测三七根和花总皂苷对肿瘤细胞增殖的抑制作用;Transwell小室法进行肿瘤细胞侵袭实验;RT-PCR检测β1-integrin、TIMP-2、EGFR mRNA表达的变化;Western blotting检测β1-integrin、EGFR蛋白表达的变化。   2、体内实验:采用裸鼠尾静脉乳腺癌血行转移模型,通过尾静脉注入MDA-MB-231细胞悬液,用不同剂量的三七根和花总皂苷灌胃给药,观察裸鼠的生长及肿瘤转移状况。RT-PCR检测β1-integrin、EGFR、TIMP-2 mRNA表达的变化。   结果   1、在浓度为50-200μg/mL时,三七花总皂苷对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖抑制作用随药物浓度增大而增强,在200μg/mL时抑制率最高,为22.84%;三七根总皂苷对肿瘤细胞的抑制作用不显著。Transwell小室实验显示,三七根和花总皂苷在浓度为10、50、100μg/mL均表现出侵袭抑制作用(P<0.01);三七花总皂苷浓度为50μg/mL侵袭力最高,达到32.0%。三七花总皂苷对各浓度组对MDA-MB-231细胞β1-integrin、TIMP-2、EGFR mRNA和β1-integrin、EGFR蛋白的表达有下调作用;三七根总皂苷对β1-integrin、EGFR蛋白的表达有下调作用,其抑制效应在不同浓度组间差别显著(P<0.01)。   2、在裸鼠尾静脉乳腺癌血行转移实验中,组织学结果表明,三七根总皂苷能显著抑制肿瘤细胞在肺内的转移,且呈剂量依赖性;三七花总皂苷也能抑制肿瘤细胞在肺内的转移,但较三七根总皂苷效果弱,且不呈剂量依赖性。RT-PCR实验显示,三七根总皂苷90、180、360 mg/kg剂量组通过下调β1-integrin mRNA的表达,90、180 mg/kg剂量组下调EGFR mRNA的表达,从而抑制裸鼠肿瘤组织的侵袭;三七花总皂苷90、360 mg/kg剂量组通过下调β1-integrin、EGFR mRNA的表达,抑制裸鼠肿瘤组织的侵袭。   结论   三七根及花总皂苷通过下调β1-integrin、EGFR mRNA和蛋白的表达,抑制肿瘤细胞与ECM粘附、增强细胞运动能力,从而抑制人乳腺癌细胞的侵袭转移。
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