【摘 要】
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该文利用高压力、光谱学等多种方法研究了三个方面的内容:鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)、3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)及限制性内切酶与DNA的反应.一、高压力作用能够明显降低IB
【机 构】
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中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
【出 处】
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中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学
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该文利用高压力、光谱学等多种方法研究了三个方面的内容:鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)、3-磷酸甘油醛脱氧酶(GAPDH)及限制性内切酶与DNA的反应.一、高压力作用能够明显降低IBDV的感染活力,适当条件下可得到完全失活的病毒,同时后者仍保持原有的免疫原性,并能诱导雏鸡产生高滴度的抗IBDV抗体.用多种方法研究证实,低温高压作用后,IBDV颗粒发生了解离,导致其形态变化和外壳蛋白的结构稳定性改变.这些结构变化可能是上述生物活性变化的原因.这些结果表明,高压力可能成为制备IBDV疫苗的一种新方法.二、兔肌GAPDH在0℃时存在明显的冷失活现象,对冷失活和复活过程的时间依赖性和浓度依赖性的研究表明,亚基解离聚合在冷失活过程中起着重要作用.高压力作用亦可令兔肌GAPDH亚基解离,低温下可得到了稳定的构象漂移态.冷失活的GAPDH与高压力构象漂移态GAPDH的性质十分相似,说明冷失活的GAPDH是非天然亚基的聚合体,从而进一步证明了寡聚蛋白的冷失活是一个伴随着构象漂移的亚基解离-重聚合过程.三、以pSPOTRl为底物研究了静水压对限制性内切酶HindⅢ和XbaⅠ的影响.高压力作用未改变此二酶的底物碱基特异性,但其反应活力均随压力升高而下,完全失活压力分别为2,000 bar和1,800 bar,反应表现体积变化分别为213和103ml/mol.高压力作用后,HindⅢ可迅速恢复原活性,而XbaⅠ则不可逆失活,说明二酶在高压力下的结构稳定性有较大差异.
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