麦冬多糖MDG-1制备关键技术研究

• 作 者: 杨琴
• 机 构: 上海中医药大学
• 出 处: 上海中医药大学
• 发表日期: 2010年期

多糖作为构成生命活动的基本物质之一,同维持生物机能密切相关。在抗肿瘤、抗炎、抗病毒、降血糖、抗衰老、抗凝血等方面均发挥着其特殊的生物活性作用。多糖广泛的生物活性和较低的毒性必将决定着它是未来临床药物研究的新秀。但多糖的制备偏重于实验室小量研究,制备工艺放大时生产成本的控制成为制约多糖研究的瓶颈问题。本课题在以往研究结果的基础上,通过大孔树脂替代凝胶柱以实现均一分子量多糖的工业化生产,解决多糖大规模生产中的实际问题,并进一步优化制备过程中的每一个可能关键点,以提高MDG-1得率,并使工艺更加稳定。同时建立了麦冬多糖MDG-1的质量标准。　　
系统地进行了MDG-1制备工艺的研究,包括药材预处理,浓缩温度、干燥方法、膜分离及大孔树脂等关键技术点。药材经压扁处理粗多糖固体得率提高50.42％,多糖得率提高58.96％,MDG-1得率提高31.75％。以麦冬多糖提取液中MDG-1含量为指标确定了浓缩温度为70℃。以多糖含量、MDG-1含量及外观为评价指标选择了喷雾干燥方法,优化喷雾干燥工艺参数为进风温度130℃,进液速度4.5ml//min,雾化压力0.53 m3/h,进风风量40 m3/h。以固体去除率、多糖含量、麦冬多糖MDG-1含量为评价指标确定膜滤前的离心工艺为2000r/min,离心10min。以多糖固体得率及固体中MDG-1含量为评价指标确定膜滤后麦冬多糖溶液浓缩至原体积的1％,醇沉至含醇量为80％精制。以脱色率、杂质吸附率、MDG-1保留率及纯度为考察指标优选了纯化工艺,确定为大孔强碱阴离子交换树脂717,湿法装柱,层析柱径高比为1:3,树脂吸附容量为0.2g/ml,上样药液pH为7,浓度0.1-0.2g/ml,预吸附1h,流速0.5ml/min,去离子水洗脱,收集1/2BV洗脱液。按确定制备工艺进行中试研究,麦冬总多糖提取工艺稳定,粗多糖得率可达41.93％,MDG-1含量为78.04％。麦冬多糖分离工艺,膜滤过程MDG-1转移率低,纯度提高仅2.11％,结合实际可去除膜滤工艺。麦冬多糖MDG-1纯化工艺稳定,MDG-1转移率为54.01％,纯度为89.73％,可作为麦冬多糖MDG-1的富集纯化方法。　　
麦冬多糖MDG-1制备工艺可简化为麦冬药材水提醇沉得到总多糖,总多糖经树脂富集纯化得到麦冬多糖MDG-1。该制备工艺稳定,与原工艺相比较,大大简化了工序,缩短了生产周期,降低了成本,适宜工业化生产,为产业化制备MDG-1及开发新药奠定了实验依据及物质基础,为多糖类药物的开发应用开辟了更广阔的前景。