【摘 要】
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目的:研究hGM-CSF在真核细胞中持续、稳定、高效表达.方法:一:hGM-CSF真核表达载体的构建.1.PcDNA-hGM-CSF的构建.2.PsecTaq2B-hGM-CSF的构建.3.将上述两种质粒分别用碱裂解
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目的:研究hGM-CSF在真核细胞中持续、稳定、高效表达.方法:一:hGM-CSF真核表达载体的构建.1.PcDNA-hGM-CSF的构建.2.PsecTaq2B-hGM-CSF的构建.3.将上述两种质粒分别用碱裂解法和聚乙二醇法进行大量制备和纯化.二、重组质粒转染哺乳动物细胞CHO(中国仓鼠卵巢细胞).1.采用脂质体介导法将出hGM-CSF重组子PcDNA-hGM-CSF和PsecTaq2B-hGM-CSF导入CHO细胞,分别用G418和Zeocin筛选得到稳定克隆并以ELISA、MTT法及SDS-PAGE、Western blot检测细胞培养上清液中rhGM-CSF的表达.2.PcDNA-hGM-CSF和PsecTaq2B-hGM-CSF共转染的表达.采用脂质体介导法将PcDNA-hGM-CSF和PsecTaq2B-hGM-CSF共转染入PcDNA3-hGM-CSF稳定表达的细胞株,给予细胞同时使用G<,418>和Zeocin进行筛选获得具有两种抗性的细胞株,并用Elisa、MTT分别定量和测定活性.结论:该实验构建的两个真核表达载体,正确地克隆到了hGM-CSF编码区序列,它们分别转染哺乳动物细胞后,能长期稳定分泌rhGM-CSF的,两者共转染同一细胞,可提高rhGM-CSF的产量.而且稳定细胞株分泌的rhGM-CSF能进行正常的糖基化.
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摘 要： 作者所在学校的学生来自全县各所中学，学生的英语水平参差不齐。若忽视学生的个体差异，采用“一刀切，齐步走”的方法进行教学，则不利于学生的多样化发展。为了大面积提高教学质量，教师必须对课堂教学进行大胆探索和改革，以更加灵活的方式进行教学。分级递进式分层次教学就是作者所在学校进行的一种积极尝试，从尊重学生的个体差异，面向每个学生及其每个方面，因材施教，以满足不同智力层次、不同基础类型学生的学习
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摘 要： 在当前新形式英语教学的背景下，要求教师在教学过程中以学生自主学习为主，培养学生在遇到问题、困难后自主讨论问题、解决问题的能力，使学生掌握自我学习的能力。下面我们就针对英语教育以学生自主学习为目标的教学模式介绍一些教学方法，从而提高英语自主教学的效率。 关键词： 初中英语 语法教学 自主学习 方法探究 初中英语是初中教学中非常重要的一门学科，英语不仅关系着学生是否可以顺利考入高中，同时
摘 要： 随着国家改革开放形势的进一步深入，英语人才的需求量逐渐增加，教育事业中英语教学的地位逐步提升。作为学生英语学习的入门阶段，初中的英语教学教学质量直接影响着英语人才的培养。阅读教学作为初中英语教学的重点，其教学效果在很大程度上关系着初中英语教学的质量。然而，就初中英语教学现状而言，初中英语阅读教学存在较大问题，需要进行初中英语阅读教学的反思与探新。本文基于初中英语阅读教学的现状，论述初中英
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