山茱萸不同栽培品种的RAPD分析

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoquan1234
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本实验收集了河南、浙江、陕西等主产地山茱萸各品种的叶片标本60份,进行RAPD,建立山茱萸的DNA遗传图谱,分析各品种之间的亲缘关系,确定山茱萸优良品种的DNA指纹图谱,并用其筛选山茱萸优良品种。主要结果如下: 1.在经典的CTAB法的基础上,对提取条件进行了改进,确定了提取总DNA的方法,该法从山茱萸叶片中提取的总DNA收率为1376μg/g~8256μg/g,经过琼脂糖电泳检测,紫外吸收检测表明,提取的总DNA杂质少、质量好,RAPD扩增效果良好。 2.对RAPD扩增反应体系和温度循环参数进行了优化:(1)反应体系:25μl反应体系,其中10×buffer2.5μl,dNTP(2.5mmol/L)3.0μl,Mg2+(25mmol/L)3.0μl,引物(2μmol/L)2.5μl,模板DNA(137.6μg/g~825.6μg/g)2.5μl,Taq酶(5U/μl)1μl,去离子水10.5μl。扩增产物在1×TAE电泳缓冲液中用1.2%琼脂糖凝胶电泳,电压为每厘米3-4伏,电泳完毕用0.5μg/ml的EB染色,拍照。(2)扩增程序:94℃预变性8min,94℃变性,1min,38℃退火,1min,72℃延伸,1.5min,共35个循环。72℃10min补齐。其中变性94℃到退火38℃的降温时间延长1min,退火38℃到延伸72℃的升温时间延长1min。 3.从100条上海生工S系列10bp的随机引物中筛选出7条扩增好、多态性稳定的引物。将这些引物用于60份材料的扩增,扩增片段大小为200bp~2000bp。从7个引物产生的谱带中共获得53个位点,其中44个位点具有多态性,多态率达到83%,说明样品具有很好的遗传多样性。 本试验以各样本之间的遗传距离为聚类统计变量,采用SPSS11.0软件计算DICE遗传相似性系数,Between-groupsLinkage方法聚类,构建亲缘关系树系图。由聚类图可以看到,河南产短圆柱形果型自成一类,和另外几种果型的亲缘关系较远。不同产地的椭圆形果型,长圆柱形果型和短梨形果型分别聚在了一起,表明这三种果型保持了较好的遗传独立性。圆柱形果型和长梨形果型亲缘关系较近,并且对于同一果型来说,产地的差异大于个体的差异。浙江产的短圆柱形果型4份样品聚为一类,保持着较好的遗传稳定性。从树状图也可以看出各栽培品种之间的遗传关系,遗传位点比较丰富的品种长圆柱形果型和短梨形果型首先聚在一起,然后是圆柱形果型、椭圆形果型、长梨形果型聚为一大类。实验结果支持了种内变异类型按照不同果型分类的方法,为山茱萸按照不同果型的分类提供了分子水平的依据。
其他文献
目的:观察黄芪有效成分黄芪皂苷甲(AM-1)对压力过载引起的左室肥厚/慢性心力衰竭大鼠的作用,并对其可能机制进行讨论。 方法:(1)采用狭窄大鼠肾动脉间腹主动脉的方法造成后负
本文从形态学,药效学和质量等方面对蟾蜕进行了系统的研究,现分述如下: 首先,本文对蟾蜍蜕皮过程进行了描述,并介绍了人工采集蟾蜕的一般过程,对蟾蜕的性状作了描述。蟾蜕的主要
十一届三中全会的召开之后,畜牧业经济体制的改革试点已初具成效,生猪的产供销一条龙已基本形成,生猪生产的专业化、商品化和社会化程度有了很大提高,目前已经出现供过于求的现象
本文以雷公藤药材所合成分雷公藤内酯醇为研究对象,通过对雷公藤根、茎、叶中雷公藤内酯醇含量的比较,确定以雷公藤叶作为提取原料,并进一步比较不同产地及不同采收季节雷公藤叶
胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)为心脑血管疾病及糖尿病常伴的一种病理生理状态,主要表现为高血糖和高胰岛素血症及胰岛素效应器官对胰岛素生理作用不敏感。高糖高胰岛素是导
诺贝尔文学奖得主莫言先生的小说《酒国》是一部实验性小说,呈现了“人吃人”的奇特王国。本文旨在从叙事技巧、人物情节设置和象征意象三个方面来分析小说中的后现代特征。
甘芍胶囊是吉林天药科技股份有限公司研制开发的现代中药复方制剂。临床主要适用于月经痛,子宫痉挛痛等症。  该新药是通过对传统中药复方芍药甘草汤进行整体肠内菌代谢研究
  本文对北五味子的人工种植品种的生产过程中的关键共性技术进行了研究及规范,并在此基础上建立了人工种植品种的化学及生物学质量评价方法,对人工种植品种的质量进行了系统
神话是一个民族的智慧结晶,融合了一个民族的精神内核,“重述神话”对于人类记忆是一种继承和发扬,本文试图通过分析“神话重述”的意义和中外现状,找出目前我们进行重述所面
目的:   1.对广西产地钱(地钱Marchantia polymorpha L.;拳卷地钱Marchantia convolute Gao et Chang.;粗裂地钱Marchantia paleacea Bert.进行分子生药学鉴别。   2.对