【摘 要】
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该论文分为两部分.第一部分工作主要是研究猪瘟病毒衣壳蛋白的一级结构及其克隆、表达和在宿主细胞内的定位.我们在实验室中首次克隆了猪瘟病毒石门株强毒F114株的衣壳蛋白cD
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该论文分为两部分.第一部分工作主要是研究猪瘟病毒衣壳蛋白的一级结构及其克隆、表达和在宿主细胞内的定位.我们在实验室中首次克隆了猪瘟病毒石门株强毒F114株的衣壳蛋白cDNA并测定其核苷酸序列,与猪瘟病毒弱毒疫苗C株的衣壳蛋白相比较,其核苷酸序列同源性为95﹪,氨基酸序列同源性为97﹪.进而在大肠杆菌中表达GST-C融合蛋白并纯化,制备了抗衣壳蛋白的抗血清,检测结果表明,该抗血清在猪瘟病毒F114株和C株感染的PK-15细胞中均可产生较强的免疫荧光反应,从而为猪瘟病毒弱毒疫苗C株在实际生产中的病毒滴度的检测提供了简便和可靠方法.第二部分工作是在该实验室中建立了以HIV-1TAT引导的蛋白转运技术.我们成功地将TAT-EGFP融合蛋白分别转入了ES细胞、NIH3TS细胞和PK-15细胞.结果初步表明TAT引导的蛋白转运没有细胞特异性,且几乎所有的细胞都可以被转导.在此基础上,我们构建了其它高转导效率更高的载体.从而为研究多肽的功能,其中包括猪瘟病毒衣壳蛋白对宿主细胞的作用和影响,建立了一项新的技术.
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