【摘 要】
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该研究将四环素诱导元件Tx插入花药绒毡层特异表达启动子TA29的TATA框附近,组成嵌合启动子TA29-Tx,将其与GUS基因编码区及OCS终止子融合,构建植物表达载体BinHyg-TA29-Tx-GUS
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该研究将四环素诱导元件Tx插入花药绒毡层特异表达启动子TA29的TATA框附近,组成嵌合启动子TA29-Tx,将其与GUS基因编码区及OCS终止子融合,构建植物表达载体BinHyg-TA29-Tx-GUS,通过基因枪法将该载体转入组成型表达tetR蛋白的烟草组织,通过瞬时表达方法检测了GUS基因的表达活性和特异性.结果表明,四环素诱导前,没有任何烟草组织染上蓝色,表明该系统不表达;而四环素诱导仅30分钟后,花药就染上明显蓝色,而且集中在花药绒毡层.其对照子房在四环素诱导前和诱导后均未染上蓝色.这些结果表明,该系统既是四环素诱导的又是花药绒毡层特异表达的.用农杆菌侵染烟草叶片的方法将上述构建好的植物表达载体BinHyg-TA29-Tx-GUS转入烟草,经Southern杂交检测,筛选出四株转基因植株,这四株烟草已移至温室,准备待其开花后作进一步生物学检测.这是在植物中首次报道的既可组织特异性表达又可诱导的系统,它将成为功能因组研究中一个强有力的工具;同样,它在植物基因工程特别是作物两系法育种中也具有良好的应用前景.
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