论文部分内容阅读
鹅膏属(Amanita)是一个世界性的广布大属，目前全球已描述且又被承认的鹅膏属约有500多种，中国已记录的近150种(含亚种、变种及变型)，由于鹅膏菌的价值大、应用范围广，倍受科学家们重视。鹅膏菌属外生菌根真菌，是自然界中难培养，难以人工或半人工栽培的真菌，这使得鹅膏属真菌的研究滞后，且难以开发利用。黄鳞鹅膏(Amanita subfrostiana Zhu L.Yang)为鹅膏科(Amanitaceae)、鹅膏属(Amanita)、鹅膏亚属(subgen.Amanita)、鹅膏组(sect.Amanita)，其在鹅膏菌中具有典型性，在武定狮子山个体较多，因此，本论文以其为研究材料，从生态环境、菌丝体培养、鉴定和种内、种间遗传多样性分析三方面进行了研究，主要研究结果如下：
1.对狮子山黄鳞鹅膏进行了生态环境研究，结果表明，天平均气温为17.7℃时出菇率最高；其适宜的光照强度是500-2500 lux(主要是散射光和反射光)；子实体形成较适宜的空气湿度为75-86％；其生长的土壤表层疏松、透气、潮湿，并且具有较厚的腐叶层，较高的有机质含量，丰富的矿物质养分，较小的容重，4.7-5.6的pH；黄鳞鹅膏子实体生长期为6天左右。
2.对黄鳞鹅膏菌丝体培养的研究表明，子实体的菌褶部位易于诱导出菌丝体；用ITS分子标记鉴定菌丝体，子实体与菌丝体的ITS(ITS1、5.8SrDNA、ITS2)序列长度都为596bp，且碱基序列完全相同，说明分离菌丝体来自黄鳞鹅膏；菌丝体最佳培养基为改良的SPDM，其pH值、葡萄糖浓度、谷氨酸浓度分别为5.4、20g/l、0.15g/l，其最适的培养温度为23℃。
3.种内种间遗传多样性研究表明：在种内，来源于狮子山及大理的6个不同子实体，ISSR标记图谱基本相同；而两地的两个子实体，ITS序列长度都是596bp，且碱基完全相同，与GenBank中的AY436476的ITS序列比对，除了有7个碱基缺失外，碱基序列完全相同，这说明黄鳞鹅膏种内遗传变异非常小。在种间，ISSR分析表明，12个种的多态性比率为83.3％；ITS序列分析表明，12个种ITS序列在长度和碱基位点上都存在较大差异(ITS1、ITS2的变异范围分别为174-266bp、147-245bp；变异位点490个，信息位点331个)，这说明种间有较高的遗传多样性；ISSR和ITS两种标记的聚类结果表明，分子分类与传统分类大致吻合，如红托鹅膏、黄鳞鹅膏和小豹斑鹅膏在两种聚类图中皆聚为一支，与传统分类一致；但也有少部分种，分子分类与传统分类存在差异，如ISSR和ITS聚类图中，白条盖鹅膏并没有和传统分类中同一组的红黄鹅膏聚在一起，这为鹅膏属的系统分类提供了一定的参考和借鉴作用。