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化学杀虫剂是农业和卫生领域广泛使用的产品之一，具有见效快，威力大等特点，在防治农业害虫、控制疾病流行方面起到了积极的作用。目前，化学性杀虫剂仍是有力的控制害虫繁殖的有效手段，但某种杀虫剂长期使用一方面害虫会对该杀虫剂产生一定的抗性，加速该杀虫剂失效，另一方面，还增加对环境的破坏和人类健康威胁。致倦库蚊是东方型马脑脊髓炎病毒和BANZI病毒的主要传播媒介，杀虫剂的广泛使用会导致该蚊种产生抗性。本研究就致倦库蚊对敌百虫的抗性相关基因——β-羧酸酯酶做了初步分析。
1.致倦库蚊的人工驯化
致倦库蚊幼虫采集于云南省普洱市，在云南省寄生虫病防治所蚊虫饲养室中饲养，温度(T)保持在25±0.5℃，湿度(RH)控制在(75±3)％。饲养幼虫用水为放置48h小时的脱氯自来水，幼虫饲料为酵母粉加鸭肝粉，比例大约为3：1。雄蚊饲喂10％左右的蜂蜜水和葡萄糖水的混合物，雌蚊饲血的血源为小白鼠血。在每日12-14 h小时的光周期下进行驯化。
2.致倦库蚊对敌百虫抗性的人工选育和抗性水平观察
敌百虫是一种常用的有机磷类杀虫剂，按照WHO推荐的方法进行基线水平测定，其半数致死浓度为1.13mg/L，然后按照该基线水平对分别以LC20(0.08mg/L)，LC50(1.13mg/L)，LC60(2.89mg/L)三种不同浓度处理致倦库蚊幼虫，经过9世代的选育，获得的抗性水平程度依次为LC60>LC50>LC20，LC60的抗性水平最高。
3.致倦库蚊对敌百虫抗性相关基因β-羧酸酯酶的克隆及序列分析
以LC60筛选的蚊虫为抗性品系，未接触过杀虫剂的蚊虫为敏感品系，按照酚-氯仿-异戊醇的方法提取蚊虫基因组DNA，设计三对引物进行PCR扩增，扩增结果经T/A克隆，并测序。经比对，发现抗性品系与敏感品系羧酸酯酶基因保守，有6个碱基发生突变，分别是TA(S)→CT(R)，AG(S)→GA(R)，T(S)→C(R)，A(S)→T(R)，位点依次是814-815，839-840，842，850；从预测的氨基酸序列上比对发现有三个位点的氨基酸发生了改变，分别是Ile→Phe,Gln→Arg,终止子转变为Leu，。经BLAST后，该基因与大多数酯酶基因相似对很高；另外，在该基因上发现有开放性阅读框(ORF)；其中抗性品系有13个阅读框，敏感品系有12个阅读框，表明该基因序列可能指导若干蛋白的表达与合成。
综上所述，在敏感品系与抗性品系羧酸酯酶的基因序列高度保守，致倦库蚊对敌百虫选择压力下，发生若干点突变，推测该突变与抗性形成有关；另外，经比对发现该基因群同源性较高，推测有该基因群共同的起源。该蚊种抗性的形成与该基因上的可读性阅读框的关系还有待于进一步的研究。