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胃肠道不仅是动物体内重要的消化器官,也是动物体内最大的内分泌器官,含有多种内分泌细胞,它们在动物摄食、消化及各种生理活动中具有重要功能,同时可能对胚胎期消化道系统的分化发育起调节作用。有关哺乳动物包括人的胚胎消化系统内分泌细胞研究较多,但低等脊椎动物胚胎消化道内分泌细胞研究资料缺乏。扬子鳄是高等的爬行动物,在脊椎动物的进化过程中处于重要的地位,对其消化系统内分泌细胞发生进行研究,可为探讨其内分泌细胞发生的一般规律,以及不同类群脊椎动物演化的亲缘关系积累重要的资料。 本实验采用免疫组织化学技术,应用13种不同的抗血清,对孵育时间8—55天扬子鳄胚胎消化道及消化腺内分泌细胞的种类进行鉴别、定位和比较,结果如下: 扬子鳄胚胎胰腺中,生长抑素、5—羟色胺、胰高血糖素、表皮生长因子、胰多肽免疫反应阳性细胞出现于第8天;P物质免疫阳性细胞出现于第18天;P53、胃泌素、睾酮、嗜铬素A、血管活性肠肽、上皮膜肮原、胰岛素免疫阳性细胞在各期扬子鳄胚胎胰腺中均未发现。扬子鳄胚胎胰腺内分泌细胞的发生与密河鳄有一定差别,其中PP阳性细胞出现的时间早于密河鳄。同时,在孵出前胰腺中,密河鳄以SS阳性细胞最多,扬子鳄以GLU细胞最多。另外,在扬子鳄胚胎胰腺中,内分泌细胞在早期都是单个分散分布,中期出现细胞群,在孵出前大多数单个分散分布,少数成群分布。 扬子鳄胚胎肝脏中,生长抑素免疫阳性细胞出现于孵育第8天肝血窦内皮细胞间;孵育第30—55天,静脉血管中发现5—羟色胺阳性血细胞和TGFβ1阳性血细胞;表皮生长因子阳性细胞和P物质阳性细胞仅在第40—55天出现于肝脏外被膜;甲胎蛋白免疫阳性细胞在第55天出现于肝脏外被膜及靠近外被膜的血管内皮。各期肝细胞均未发现表达胰高血糖素、胰多肽、生长抑素、5-羟色胺、P物质、表皮生长因子、甲胎蛋白。 生长抑素、5—羟色胺、胰多肽、表皮生长因子、转化生长因子β1、P物质免疫阳性细胞在食管、胃、十二指肠均有分布。另外,胰高血糖素、胃泌素、血管活性肠肽免疫阳性细胞在胃有分布,胰高血糖素、胃泌素免疫阳性细胞在十二指肠中有分布。各种内分泌细胞出现的时间、分布位置、数量的变化不同。 扬子鳄胚胎消化道早期内分泌细胞种类和数量较少,在中期内分泌细胞的种类和数量增多。在胚胎发育后期,消化道中以胃的内分泌细胞数量和种类最多,也是内分泌调控最重要的部位,其次是十二指肠。另外,胚胎期扬子鳄消化道内分泌细胞的种类和分布与成体有差异,胚胎期消化道检出胰高血糖素、胰多肽和P物质免疫阳性细胞,而成体未检出;胚胎期消化道中胃泌素、血管活性肠肽,生长抑素免疫阳性细胞分布与成体消化道不同。与成体消化道内分泌细胞数量相比较,胚胎期消化道内分泌细胞数量多。 纵观扬子鳄胚胎消化道和消化腺内分泌细胞发生的情况,可得出如下结论:*)胚胎发育早期,胰腺内分泌细胞的数量和种类较多,可能是早期胚胎重要的内分泌调控部位;胚胎中期消化道和消化腺内分泌细胞的数量和种类增加最多,是内分泌细胞分化发育的重要时期:胚胎晚期,以胰腺和幽门、十二指肠的内分泌细胞最密集,为孵出后的消化和吸收的功能调控做好生理准备。仅)孵出前胚胎胰腺内分泌细胞大多数分散分布,少数成群分布。扬子鳄胰腺在进化上仍处于较低等的位置。o)扬子鳄消化道内分泌细胞的发生与胰腺内分泌细胞的发生有较大的相关性,胰腺对消化道内分泌细胞的发生可能具有同种内分泌细胞的诱导作用。