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植物发育是一个集细胞分裂、生长和分化为一体的过程,细胞分裂是受细胞周期调控的。在细胞周期中,有两个关键的控制点,即G1/S期、G2/M期的转变。在拟南芥中,D型细胞周期蛋白CYCD3;1限制G1/S期的转变速度。目前对影响植物生长发育的细胞分裂和细胞分化的复杂关系了解不多。为了研究细胞D型周期蛋白CYCD3;1对拟南芥形态结构发生和生长发育的影响,我们用基于雌激素受体的化学诱导表达系统(XVE启动子)来超量表达细胞周期蛋白CYCD3;1。我们的研究结果表明CYCD3;1的超量表达不仅抑制拟南芥初生根的伸长、根毛区和侧根的形成,而且还抑制初生根对重力刺激的反应能力。同时我们还发现CYCD3;1的超量表达延迟拟南芥的发育,抑制子叶和莲座叶中的细胞退出细胞周期。表明植物中根和叶的正常发育,根向重力性反应能力的保持都需要细胞周期活动(调控细胞分裂)和细胞分化的协同作用。我们获得了三个株系的转基因拟南芥,并在拟南芥基因组中进行T-DNA定位,实时定量PCR分析发现不同株系转基因拟南芥中CYCD3;1的表达量存在较大差异,表明转基因拟南芥中存在明显的位置效应。
本论文新颖之处在于,本文用的雌激素诱导的启动子能定时定量定点表达CYCD3;1,而且这种诱导作用是严格和高效地受雌激素调控的。同时通过诱导与非诱导的转基因植株的比较,排除了转基因操作本身对植株的影响,能更加清晰准确地研究CYCD3;1的表达对拟南芥发育的影响。