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组织芯片的概念是1998年由Kononen等首次提出，即将数十个、数百个乃至上千个小的组织片按预先设计的需要整齐地排放在某一载体上(通常是载玻片)而成的矩阵微缩组织切片。它可以克服传统病理技术只能逐个组织切片进行研究的方式，从而成百、成千倍地提高效率，一次检测即可获取大量的生物学信息，且可以很好地代表其供体组织的组织特点，大大减少研究时间和经费耗费。同时，组织芯片技术可以与DNA、RNA、蛋白质、抗体等技术相结合，在基因、基因转录和相关表达产物生物学功能三个水平上进行研究。这对人类基因组学的研究与发展，尤其对基因和蛋白质与疾病关系的研究、疾病相关基因的验证、疾病的分子诊断、治疗过程的追踪和预后等方面具有实际意义和广阔的市场前景。
原发性肝癌是一种常见的恶性肿瘤，其死亡率占全球恶性肿瘤死亡率的第三位，为我国恶性肿瘤死亡率的第二位，而肝细胞肝癌(HCC，以下简称肝癌)占我国原发性肝癌中的80％以上。尽管肝癌的预防、早期诊断及治疗等均取得了可喜的进步，但肝癌人群的总体预后仍无显著提高，5年生存率只有5％左右，肝内播散转移及复发是阻碍病人术后长期生存的最严重问题。
肝癌的复发转移是一个多步骤、多环节的过程。Folkman等1971年提出了肿瘤生长依赖新生血管的概念。而肝癌是富血管实体瘤，不管是肝内复发还是肝外转移，直接或间接参与血管生成的因素在肝癌的术后转移复发中起非常重要的作用。当前，肿瘤血管生成的评估包括肿瘤微血管密度(MVD)和血管生成因子检测两个方面。血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血小板衍化内皮细胞生长因子(PD-ECGF)等是重要的血管生成因子，与肿瘤的MVD和预后相关。
复发的预防措施主要是抑制、消灭残癌，防止肿瘤再发。目前对于术后复发率高这样一个现象的对策是：术后给予预防性化疗栓塞或干扰素的大剂量治疗等方法。但是目前更合理的方案是选择性地对复发高危患者实施预防性治疗，减轻患者的痛苦和经济负担。因此临床迫切需要能够准确预测病人预后的指标。
本课题拟应用组织芯片技术来制备肝癌组织芯片，并将其应用于研究MVD和血管生成因子VEGF和PD-ECGF在肝癌中的表达及其与预后的关系。
方法：
1．肝细胞癌组织芯片的制作
随机选取1997年1月～2000年12月间在中山医院肝癌研究所第一次行肝癌切除术，并经组织病理学检查证实为肝细胞肝癌的400例病人的组织标本石蜡块，应用组织芯片技术分别制作成5组各100例中密度肝癌组织芯片：A组一AFP(甲胎蛋白)阴性未复发组芯片；B组一AFP阴性复发组芯片；C组一AFP阳性未复发组芯片；D组一AFP阳性复发组芯片以及E组一相应的癌旁对照组芯片。芯片上各组织点直径均为lmm，组织芯片位点排列整齐，较少移位和脱点。
2．血管生成因子在肝细胞癌中的表达及其与预后的关系
应用免疫组织化学染色方法研究肝癌组织芯片中MVD计数及VEGF和PD-ECGF的表达情况。单因素方差分析比较组间MVD差异，Log-rank法比较不同VEGF和PD-ECGF表达组间5年生存率(以下简称生存率)和5年无瘤生存率(以下简称无瘤生存率)的差别。卡方检验(Fisher精确检验法)比较各组间5年累积复发率(以下简称复发率)和5年累积死亡率(以下简称死亡率)之间的差别；联合检测VEGF和PD-ECGF以评定其对预后的预测作用。COX比例风险模型进行多因素分析以了解各个相关因素对生存率和无瘤生存率的影响。
结论：
(1)组织芯片具有高通量、高效、快速的特点，其组织位点基本可以代表传统病理切片上的组织病理特征，即从组织芯片得到的研究结果能够代表原组织的所有信息。
(2)肿瘤MVD计数与肝癌切除术后复发率呈正相关。
(3)肿瘤PD-ECGF表达阳性提示肝癌术后复发率和死亡率增高，生存率和无瘤生存率均显著降低。
(4)肿瘤VEGF表达阳性提示术后高复发可能，无瘤生存率显著降低，但与生存率和死亡率无相关性。
(5)肿瘤VEGF和PD-ECGF同时表达阳性病例的复发率显著高于非同时阳性病例，其无瘤生存率显著降低，而在生存率和死亡率方面则无显著差异。
(6)对于AFP阳性肝癌病例，肿瘤PD-ECGF表达阳性或VEGF和PD-ECGF同时表达阳性提示术后高复发可能；对于AFP阴性肝癌病例，肿瘤PD-ECGF或VEGF表达阳性均提示术后高复发可能。
(7)癌栓、MVD和VEGF都是肝癌切除术后无瘤生存率的独立影响因素；肿瘤直径、肿瘤包膜、癌栓和MVD是肝癌切除术后生存率的独立影响因素。