条斑星鲽Verasper moseri雌核发育诱导及性别分化过程的初步研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:hubeibei1919
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条斑星鲽(Verasper moseri),外观漂亮优美,富含胶原蛋白,肉质细嫩鲜美,生长快,经济价值高,具有很大的开发价值和养殖潜力,成为研究人员和海水养殖业主要研究和开发的对象之一。为了增加资源量,满足市场需求,2004年条斑星鲽被引进到我国,在辽宁、河北和山东等省进行驯化及试验养殖,现在已经取得了初步成功,为这些地区增加了新养殖品种。条斑星鲽具有雌性个体大于雄性个体的特点,如能充分发挥其特点,达到全雌化养殖目的,则具有重要产业化意义。本文对条斑星鲽雌核发育诱导、雌核发育胚胎发育观察及性别分化组织学观察进行了研究。旨在为条斑星鲽人工繁殖和人工控制性别提供基础数据。结果如下:1.探讨了不同紫外线剂量对牙鲆精子的作用,查明牙鲆精子失活的最佳条件。用紫外线照射时间为1、2、5、10、20、45、60、90、120s的牙鲆精子激活条斑星鲽卵子,受精卵孵化率出现了典型的Hertwig效应,照射时间60s受精卵孵化率最高,为13.68%。2.用冷休克方法抑制第二极体排放,成功获得条斑星鲽雌核发育二倍体。冷休克起始时间参数设定为7、9、11、13、15、17min,冷休克持续时间参数设定为30、60、90、150min,冷休克温度参数设定为-1.5、0、1.5、3℃,通过孵化率和畸形率选择最佳冷休克条件。实验结果表明诱导条斑星鲽雌核发育二倍体的最佳条件是:在受精后11min,-1.5℃~0℃的海水中冷休克处理受精卵60min。3.对条斑星鲽雌核发育胚胎、单倍体胚胎和普通胚胎进行了观察。单倍体是由紫外线灭活牙鲆精子激活条斑星鲽卵子孵化获得,雌核发育胚胎是由紫外线灭活牙鲆精子激活条斑星鲽卵子后冷休克处理获得,普通二倍体是由条斑星鲽精卵正常受精获得。观察结果表明:单倍体胚胎,卵裂开始至64细胞期,发育速度较普通胚胎发育发育速度明显缓慢,至多细胞期发育速度相同,历时14h;到达高囊胚期比普通二倍体缓慢1.5h,到达低囊胚期发育速度相同,历时31h;到达原肠末期、神经胚期、晶体形成期历时相同,其它发育时期一直处于缓慢状态;孵化仔鱼具有明显的单倍体综合症;雌核发育与普通胚胎的发育的特征相比无明显区别,在卵裂期发育速度明显迟缓,但在囊胚期以后,所用时间基本相同;孵化时间比普通胚胎长约1小时;与普通胚胎相比,雌核发育胚胎、单倍体胚胎孵化率较低,仔鱼畸形率高。4.采用组织学方法对室内人工培育条斑星鲽性别分化进行了观察。观察结果表明:30日龄仔鱼,原始生殖细胞(PGCs)与生殖脊共同构成性腺原基;60日龄,其性腺可见生殖细胞快速增值;80日龄,卵巢腔已形成;100日龄,卵巢中可见少数卵母细胞;120日龄,精原细胞大量增加,并形成精小叶。本研究通过适量的紫外线照射使牙鲆精子失活,用温度休克方法有效抑制了条斑星鲽受精卵第二极体排出,国内外首次成功利用灭活异源牙鲆精子诱导出雌核发育条斑星鲽,同时研究了条斑星鲽性别分化过程,为进一步开展条斑星鲽育种及性别控制奠定了基础。
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