重组人白细胞介素-6融合蛋白发酵工艺研究

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该文系统的研究了重组大肠杆菌表达白细胞介素-6融合蛋白的发酵工艺条件.摇瓶实验中,确定了以含1‰葡萄糖的2×YT培养基为最适合该菌种间歇发酵的培养基.同时,对诱导剂量进行优化,采用0.02mmol/L的IPTG就能有效的诱导外源蛋白的表达,大大节约了成本.在10L发酵罐间歇实验中,以含1‰葡萄糖的2×YT为培养基,得到的最优培养条件为:pH为6.75-7.0,接种量4%,温度37℃,诱导前溶氧30%,在OD<,600>为1.2-1.8时诱导,诱导后控制溶氧为5-10%,诱导后培养5小时结束发酵.流加仿指数流加,在OD<,600>为7.5左右诱导,控制诱导后比生长速率为0.15h<-1>.以葡萄糖为主要能源的培养基,采用恒pH流加,可获得菌体湿重达60g/L,表达量为30%.
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