铬暴露对草鱼的氧化损伤及抗氧化能力的影响

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本文以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为实验对象,采用水体染毒法,探讨铬暴露对草鱼的氧化损伤及抗氧化能力的影响。首先通过预实验测定了水体六价铬对草鱼的96h半致死浓度(96h LC50),然后参考预实验测定的96h LC50,将其暴露于不同浓度梯度(0、7.23、14.47和28.94mg/L)的Cr6+水体中,于24、48、72和96h测定草鱼肝胰脏、鳃和肾脏中丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)水平,同时测定了肝胰脏、鳃中过氧化氢酶(CAT)和肝胰脏中谷胱甘肽S-转移酶(GST)的活性。本研究旨在探讨水体铬暴露对草鱼可能造成的氧化损伤以及鱼体内的抗氧化酶防御系统对铬污染胁迫的应对能力和机制,以期为环保部门制定相关污水排放标准和防护措施以及为水产养殖水质控制提供一定的实验依据。本研究取得的主要结果如下:1.在预实验中,随六价铬浓度的增加草鱼死亡率明显升高,求得水体铬对草鱼的96h半致死浓度(LC50)和安全浓度(SC)分别为57.88和5.79mg/L。2.铬暴露对草鱼肝胰脏的影响(1)从浓度-效应看,草鱼肝胰脏MDA含量变化均表现为随Cr6+浓度的增加而增加。在24h时,随Cr6+浓度的升高,各浓度组草鱼肝胰脏MDA含量逐渐增加,但与对照组相比均无显著差异(p>0.05)。当暴露时间延长至48、72和96h时,3个浓度组的MDA含量随着铬浓度升高而增加,且各浓度组的MDA含量均显著高于对照组(p<0.05);从时间-效应看,各浓度组MDA含量整体呈增加趋势,且在72和96h时,14.47和28.94mg/L浓度组的MDA含量与24h时相比,均显著增加(p<0.05)。表明六价铬的暴露时间越长、浓度越高,由此产生的活性氧自由基越多,脂质过氧化程度越高。(2)从浓度-效应看,在24h时,随Cr6+浓度的增加,草鱼肝胰脏中T-AOC水平的变化趋势为先升高后降低,与对照组相比,差异不显著(p>0.05)。在48和72h时,T-AOC水平的总体变化趋势为随Cr6+浓度的升高逐渐升高,且在48h时14.47和28.94mg/L浓度组和72h时28.94mg/L浓度组的T-AOC水平与对照组相比均被显著诱导(p<0.05)。96h时,T-AOC水平的变化趋势为先升高后降低,当暴露浓度为7.23mg/L时,T-AOC水平被显著诱导,后随浓度的升高被诱导的程度有所减弱;从时间-效应看,7.23mg/L浓度组T-AOC水平整体呈上升趋势,且在96h时被显著诱导,而14.47和28.94mg/L浓度组的T-AOC水平呈先上升后下降趋势,在48h均被显著诱导(p<0.05),随后被诱导的程度减弱。(3)草鱼肝胰脏CAT和GST活性的总体变化趋势为:在24和48h时,CAT和GST活性被不同程度地诱导,在72和96h时,CAT和GST活性先被诱导随后被诱导的程度减弱甚至被抑制;从时间-效应看,除7.23mg//L组的GST活性被持续诱导和28.94mg/L组的CAT诱导减弱甚至被抑制外,其余各实验组的CAT和GST总体呈先上升后下降的趋势。此外,肝胰脏中GST和CAT对铬应激的敏感程度不同,在72和96h时,7.23mg/L浓度组GST活性被显著诱导,高浓度组时即被显著抑制,而在同浓度下CAT活性变化不显著,提示在Cr6+暴露下肝胰脏GST的敏感性要高于CAT。3.铬暴露对草鱼鳃的影响从浓度-效应看,在24h,草鱼鳃MDA含量和T-AOC水平逐渐上升,48和72h,草鱼鳃MDA含量和T-AOC水平进一步增加,在96h,MDA含量持续增加,T-AOC水平则出现先被显著诱导随后被诱导的程度减弱;从时间-效应看,各浓度组的MDA含量随染毒时间的延长持续增加,而高浓度组的T-AOC水平则出现先升后降。从浓度-效应看,在染毒期间,各浓度组草鱼鳃组织CAT活性随Cr6+浓度的增加而升高;从时间-效应看,各浓度组CAT活性随染毒时间的延长整体呈先上升后下降的趋势,在72h时其活性最高,随后其诱导能力降低。4.铬暴露对草鱼肾脏的影响在染毒期间,各浓度组草鱼肾脏中MDA含量随Cr6+浓度的增加逐渐上升;染毒24和48h时,各浓度组T-AOC水平随暴露浓度的增加而增加,在72和96h时,各浓度组T-AOC水平总体呈先升高后下降的趋势。5.铬暴露对草鱼的氧化胁迫具有一定的组织特异性,且三种组织受氧化胁迫的程度依次为肾>肝>鳃,而抗氧化能力的强弱依次为鳃>肝>肾。本研究表明草鱼对铬毒性的耐受性相对较高。此外,铬暴露可引起草鱼肝胰脏、鳃和肾脏组织发生不同程度的氧化损伤进而使包括CAT和GST抗氧化酶在内的T-AOC水平受到不同程度的影响,表明铬暴露对草鱼的氧化损伤具有一定的组织特异性。低浓度、短时间的铬暴露不会引起显著的氧化损伤,抗氧化水平出现轻微的上调。随着暴露浓度的升高和时间的延长,各器官组织受到的氧化损伤逐渐加剧,具有明显的浓度-效应和时间-效应关系,而抗氧化能力在上调到一定高度后就不再继续增高,转而出现下降甚至被抑制,提示草鱼应对铬暴露的能力有限,机体内氧化与抗氧化的平衡可能被打破。
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