【摘 要】
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目的:研究养精胶囊促进Leydig细胞睾酮合成的分子机制。 方法:1周龄、4周龄、12周龄、12月龄雄性小鼠各6只,分别为幼年期组、性发育前组、性成熟期组及老年组。饲养三天,适
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目的:研究养精胶囊促进Leydig细胞睾酮合成的分子机制。 方法:1周龄、4周龄、12周龄、12月龄雄性小鼠各6只,分别为幼年期组、性发育前组、性成熟期组及老年组。饲养三天,适应环境后,各组小鼠全部脱颈处死,取双侧新鲜睾丸组织,采用Real-time PCR法检测Nur77 mRNA的表达,Western blot法检测Nur77蛋白的表达。以体外培养的小鼠MLTC-1细胞为模型,不加或者加入养精胶囊提取液(0.01~1 mg/mL)作用后,用Real-Time PCR和Western Blot法检测Nur77的mRNA和蛋白质的表达;用荧光素酶报告基因法检测Nur77基因的启动子活性;利用Nur77干扰腺病毒(Ad-siNur77)和空载腺病毒(Ad-CMV)转染MLTC-1,通过放射免疫法检测MLTC-1细胞培养液上清的睾酮含量;Real-Time PCR和Western Blot法检测StAR及HSD3B的mRNA和蛋白质的表达。 结果:幼年期组、性发育前组、性成熟期组、老年组小鼠睾丸组织中Nur77 mRNA相对表达量以性发育前组最高,与余3组相比,有统计学差异;Nur77蛋白相对表达量以性成熟期组最高,与余3组相比,有统计学差异;干涉MLTC-1细胞Nur77基因表达后,MLTC-1细胞基础水平的睾酮合成、StAR和HSD3B的表达均明显下降;养精胶囊提取液作用于体外培养MLTC-1细胞后,Nur77的mRNA和蛋白质表达水平均呈现出剂量与时间依赖性的变化;Nur77基因的启动子活性明显增加;干涉MLTC-1细胞Nur77基因表达后,明显抑制了养精胶囊提取液对MLTC-1细胞睾酮合成的促进作用,降低了养精胶囊提取液对MLTC-1细胞内StAR和HSD3B mRNA及蛋白质的表达。 结论:不同鼠龄小鼠睾丸组织中Nur77的表达有所差别;养精胶囊能够促进MLTC-1细胞的睾酮合成及StAR和HSD3B的表达,这种促进作用可能被Nur77所介导。
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