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目的：探讨大鼠T细胞疫苗的制备方法及其抗移植排斥反应的作用和机制。
材料和方法：一、T细胞疫苗的制备和保存(1)分离供体SD大鼠的脾细胞，用贴壁培养法和尼龙毛吸附的方法初步纯化脾细胞。(2)以2×107个脾细胞腹腔注射免疫受体WISTAR大鼠，一周后加强免疫一次。于第二次免疫后一周，取受体WISTAR大鼠的脾脏，分离纯化脾细胞；以RPMI1640为培养基、ConA为刺激物在体外培养增殖脾细胞，绘制细胞生长曲线，以明确脾细胞增殖所需要的合适时间。(3)受体的脾细胞培养4天后，收集细胞，用终浓度为25ug/ml的丝裂霉素C，37℃水浴30分钟灭活。处理后的细胞，即为针对供体SD大鼠的特异性T细胞疫苗。(4)比较疫苗细胞在4℃、-70℃保存0，7，14，21天时的活细胞的百分率，以寻找合适的保存条件。
二、T细胞疫苗作用的体外实验在皮肤移植前21d,14d，7d按每次以2×107个细胞给受体Wistar大鼠腹腔注射取材于自身的T细胞疫苗，每周一次，连续3周。分别于T细胞疫苗接种前和第三次接种后第5天采集供体、受体外周血淋巴细胞行单向混合淋巴细胞反应(MLR)：以被免疫的受体Wistar大鼠的外周血的淋巴细胞作为反应细胞，以经丝裂霉素C处理的相对应的供体的外周血的淋巴细胞作为刺激细胞，同时设阴性对照组，共同培养96h后，MTT法检测细胞增殖情况，以吸光度(A)值表示，以抑制率{抑制率=(1-接种后/接种前)×100％}表示反应细胞的受抑制情况。
三、疫苗作用的体内实验受体接种三次疫苗后，以Wistar大鼠为受体，以与之相对应的SD大鼠为供体进行同种异品系皮肤移植，观察皮肤移植物存活的时间。根据处理方法的不同，将实验分为三组：(Ⅰ)特异性TCV组(s-TCV)：以TCV接种后的Wistar大鼠为受体，以与之相对应的提供脾细胞为刺激抗原的SD大鼠为供体；(Ⅱ)非特异性TCV组(n-TCV)：以TCV接种后的Wistar大鼠为受体，SD大鼠为供体但其与疫苗细胞无关，处理同实验组；(Ⅲ)对照组，以RPMI1640培养液作为“疫苗”接种，处理同实验组。
结果：一、脾细胞悬液经过贴壁培养的方法去除贴附生长型的巨噬细胞等，尼龙毛吸附的方法去除B淋巴细胞。处理细胞后，T细胞纯度为80％。
二、脾细胞体外原代培养，培养的前48h细胞总数表现下降趋势，细胞培养3天后细胞总数开始表现为增加，随后进入快速增殖阶段。细胞培养时间4天时所获得的细胞量可以增殖数倍。
三、细胞体外保存的情况表明，在4℃环境下保存细胞，保存两周后细胞基本溶解。而在-70℃的保存温度，细胞保存21天，其活力为最初活力的(68.3±1.7)％。
四、MLR实验结果显示，在s-TCV组，受体的淋巴细胞反应接种前及第三次接种后的吸光度值分别为0.657±0.028，0.104±0.003，第三次接种后淋巴细胞反应的抑制率为84.2％，在n-TCV组，接种前和第三次接种后的吸光度值分别为：0.668±0.024，0.388±0.006，第三次接种后淋巴细胞反应的抑制率为42.2％，对照组接种前和三次接种后的吸光度值分别为：0.646±0.026，0.632±0.029。三组结果两两比较均存在统计学意义的差异(p值均小于0.05)
五、大鼠同种异体皮肤移植实验显示：s-TCV组皮肤移植物存活时间为27.5±1.6天，n-TCV组为18.4±1.5天，对照组为11.7±1.3天，三组结果两两比较均存在统计学意义的差异(p值均小于0.05)。
结论：一、脾细胞用初步纯化的方法纯度可以达到80％，能够满足实验要求；实验发现细胞培养时间为4天时所获得的实验细胞量比较合适；疫苗细胞-70℃保存21天仍具有一定的活力，可满足实验要求，此保存条件可适用于本实验。
二、体外混合淋巴细胞反应证实了应用T细胞疫苗可以在短期内诱导出一定的针对特异性抗原的免疫耐受，其诱导作用具有抗原特异性，同时伴有非特异性效应；可为下一步的器官移植创造较为理想的免疫接受环境。
三、T细胞疫苗能够延长同种异体皮肤移植物的存活时间，有一定的抗皮肤移植急性免疫排斥反应的作用。