急性冠脉综合征患者CD4+T细胞DNA甲基化异常的研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jingliang3334
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目的:通过研究急性冠脉综合征(ACS)患者外周血CD4+T细胞DNA甲基转移酶(Dnmt)蛋白水平以及CD70基因启动子调节序列的甲基化状态,探讨ACS患者CD4+T细胞DNA甲基化异常在CD70表达中的作用。  方法:采用密度梯度离心分离正常人和ACS患者外周血单个核细胞,免疫磁珠分离CD4+T细胞;Western blot技术检测Dnmts蛋白水平;聚合酶链式反应(PCR)技术检测CD70mRNA表达水平;亚硫酸氢钠测序检测CD70(TNFSF7)基因启动子调节序列的甲基化状态。  结果:与正常对照组相比,ACS患者CD4+T细胞Dnmt1和Dnmt3a蛋白水平显著减低,差异具有统计学意义(P<0.001),而Dnmt3b蛋白水平无明显变化,且无统计学意义(P>0.05);与正常对照组相比,ACS患者CD4+T细胞CD70mRNA表达水平显著增加,CD70基因启动子的甲基化水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD70基因启动子DNA甲基化水平与CD70mRNA表达水平呈显著负相关(P=0.01,r=-0.887)。  结论:ACS患者外周血CD4+T细胞Dnmt1和Dnmt3a蛋白水平显著减低,提示ACS患者CD4+T细胞基因组DNA处于低甲基化状态;ACS患者CD4+T细胞CD70mRNA表达水平增高,提示基因水平转录异常可能是CD4+T细胞上CD70过度表达的主要原因;ACS患者CD4+T细胞CD70基因启动子区域甲基化水平减低,并与CD4+T细胞CD70mRNA表达水平呈负相关,证实了ACS患者CD4+T细胞DNA甲基化异常导致ACS患者CD4+T细胞CD70异常表达。
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