【摘 要】
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[目的]研究抗氧化剂白藜芦醇在鱼藤酮诱导的PC12细胞线粒体毒性中的保护作用及机制。[材料和方法]浓度梯度白藜芦醇预处理已经构建好的鱼藤酮染毒PC12细胞模型24h,选出最
【机 构】
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第三军医大学军事预防医学院毒理学研究所,重庆
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]研究抗氧化剂白藜芦醇在鱼藤酮诱导的PC12细胞线粒体毒性中的保护作用及机制。[材料和方法]浓度梯度白藜芦醇预处理已经构建好的鱼藤酮染毒PC12细胞模型24h,选出最佳浓度后,PC12细胞分为对照组、鱼藤酮染毒组和白藜芦醇预处理组三组,显微镜观察细胞形态;CCK-8试剂盒检测细胞活性;Annexin V-FITC试剂盒流式分选检测细胞凋亡情况;线粒体绿色荧光探针染色后激光共聚焦显微镜下照相分析线粒体的形态和质量;细胞DNA提取后荧光定量PCR半定量线粒体DNA拷贝数;细胞RNA提取后RT-PCR检测线粒体新生相关PGC-1 α、mtTFA以及线粒体分裂融合相关OPA1、MFN2、Drp1、Fis1在mRNA水平上的表达变化;细胞总蛋白提取后Western-blot检测线粒体新生相关PGC-1α、mtTFA以及线粒体分裂融合相关OPA1、MFN2、Drp1、Fis1在蛋白水平上的表达变化;检测PC12细胞的ROS水平及ATP水平。[结果]鱼藤酮可引起PC12细胞活性降低及早期凋亡,白藜芦醇预处理组的细胞活性显著高于鱼藤酮染毒组且细胞凋亡比例明显减少;白藜芦醇预处理明显改善了鱼藤酮所致的线粒体质量下降,减少了含有碎片化线粒体细胞的数量,线粒体的形态也得到了一定的恢复;白藜芦醇预处理组线粒体DNA拷贝数显著高于鱼藤酮染毒组;鱼藤酮染毒PC12细胞可以引起线粒体新生相关PGC-1 α、mtTFA以及线粒体分裂融合相关OPA1、MFN2、Drp1、Fis1在mRNA及蛋白表达水平的显著降低,而上述因子的mRNA和蛋白表达在白藜芦醇预处理组中得到显著的提升;白藜芦醇预处理可显著改善鱼藤酮所致细胞ROS水平升高以及ATP降低。[结论]研究结果提示,白藜芦醇可以通过促进线粒体新生以及调控线粒体分裂/融合的动态平衡,维持线粒体稳态,从而对鱼藤酮诱导PC12细胞线粒体毒性具有一定的保护作用。
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