【摘 要】
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由于SSR-PCR反应易受Taq酶、Mg2+、DNA模板、dNTPs及引物的浓度等因素影响，为此采用正交设计方法，筛选出最适宜的反应体系及扩增程序，为EST-SSR标记更好地应用于核桃遗传多样性
【机 构】
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北京市农林科学院林业果树研究所,北京100093
【出 处】
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第七届全国干果生产与科研进展学术研讨会
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由于SSR-PCR反应易受Taq酶、Mg2+、DNA模板、dNTPs及引物的浓度等因素影响，为此采用正交设计方法，筛选出最适宜的反应体系及扩增程序，为EST-SSR标记更好地应用于核桃遗传多样性分析、种质鉴定及分子标记辅助育种奠定良好的基础。本研究通过5因素(Taq酶、Mg2+、DNA模板、dNTPs及引物)4水平正交实验,建立了核桃EST-SSR扩增最佳反应体系(201):0.75U Taq酶、2.5mmol/L Mg2+、0.4mol/L Primer、0.3mmol/L dNTPs、20ng模板DNA、双蒸水补足201.确定了PCR适宜的退火温度为55℃,最佳循环次数为30次。
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