【摘 要】
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目的 基于多肽类分子探针的c-Met靶向分子成像 方法 一,构建基于c-Met靶向多肽的分子探针,对筛选自多肽展示库并已知具有c-Met靶向性的多肽片段cMBP进行结构改造,即添加连接物HYNIC合成前体HYNIC-cMBP,以便于进行放射性核素99mTc的标记,反应条件为前体与成比例的Tricine、EDDA、SnCl2溶液在80度条件下反应25分钟,反应混合物通过18C柱子梯度淋洗和伽玛探测仪
【出 处】
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中华放射学学术大会2016、中华医学会第23次全国放射学学术大会暨中华医学会第24次全国影像技术学术大会
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目的 基于多肽类分子探针的c-Met靶向分子成像 方法 一,构建基于c-Met靶向多肽的分子探针,对筛选自多肽展示库并已知具有c-Met靶向性的多肽片段cMBP进行结构改造,即添加连接物HYNIC合成前体HYNIC-cMBP,以便于进行放射性核素99mTc的标记,反应条件为前体与成比例的Tricine、EDDA、SnCl2溶液在80度条件下反应25分钟,反应混合物通过18C柱子梯度淋洗和伽玛探测仪获得纯化产物.二,评价探针理化特性,探针的理化性质主要包括探针的脂溶性、毒性和放化合成产率,其中脂溶性是将一定剂量的探针加入正辛醇和水的混合物(1：1)充分涡旋后13000转离心5分钟,分层后分别测同等体积二者的放射性计数,计算出logP值,即可反映探针脂溶性.三,在细胞水平评估探针靶向性,选取三种不同c-Met表达水平的非小细胞肺癌细胞系,即H1993(高扩增、高表达)、H441(中等表达)、H1299(阴性表达),进行细胞摄取和释放实验.具体为将三种细胞悬液均匀铺在12孔板,每孔105个细胞,孵箱培养过夜后加入1微居/毫升的探针每孔1毫升,分别在15、30、60、120分钟后收集细胞并统一测量放射性计数值.四,在体水平评估探针靶向性,即建立三种细胞系裸鼠肿瘤模型,鼠尾注射探针,每鼠200微居,分别进行注射后0.5、1、2、4小时的SPECT成像. 结果 探针放化产率较高,H1993细胞具有最高摄取,最高摄取时间点为1h,成像实验仅H1993模型有阳性结果. 结论 经过细胞及在体水平验证,探针具有良好的c-Met靶向性.
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