【摘 要】
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目的:研究气体信号分子硫化氢对大鼠气道平滑肌细胞增殖和细胞周期调控的作用及其机制.研究对象及方法:贴壁法分离培养SD大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs),给予不同浓度NaHS处理细胞,台盼蓝染色观察细胞活力;NaHS 10-4 M处理细胞24小时后采用5-溴-2-脱氧尿苷酶联免疫检测法,观察NaHS对气道平滑肌细胞DNA合成的影响,流式细胞仪检测细胞周期时相,western blot检测细胞外调节蛋白
【机 构】
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北京大学第三医院呼吸科,北京 100191 北京大学医学部基础医学院生物活性小分子实验室,分子心血
【出 处】
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第六届全国慢性阻塞性肺疾病学术会议
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目的:研究气体信号分子硫化氢对大鼠气道平滑肌细胞增殖和细胞周期调控的作用及其机制.
研究对象及方法:贴壁法分离培养SD大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs),给予不同浓度NaHS处理细胞,台盼蓝染色观察细胞活力;NaHS 10-4 M处理细胞24小时后采用5-溴-2-脱氧尿苷酶联免疫检测法,观察NaHS对气道平滑肌细胞DNA合成的影响,流式细胞仪检测细胞周期时相,western blot检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)及其磷酸化表达水平.
结果:10-4M NaHS孵育气道平滑肌细胞最长24小时,对细胞活力无明显影响,没有引起细胞坏死.NaHS (10-4M)能够显著降低体外培养的气道平滑肌细胞BrdU参入量,对气道平滑肌细胞增殖有显著抑制作用(p＜0.05).流式细胞仪检测细胞周期时相,NaHS(10-4M)组G0/G1期细胞数较对照组增加(71.91±0.2634 vs 57.83±0.3837),S期细胞数较对照组减少(14.72±0.3252 vs 25.95±1.628).血清刺激15min和2h时,对照组与NaHS组ERK磷酸化水平无明显差异(p＞0.05).
结论:研究发现硫化氢能够抑制气道平滑肌细胞增殖,使细胞周期停滞,但是ERK通路并不参与这个过程.
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