猪沙波病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用

来源 :第六届南京农业大学畜牧兽医学术年会——猪禽疫病综合防控研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huwei00
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  本文以原核表达重组蛋白作为抗原建立了猪沙波病毒(SaV)抗体的间接ELISA检测方法。使用矩阵滴定法确定抗原包被浓度为6.4ug/mL,血清稀释倍数为1:50。试验选用1%BSA作为封闭液,血清和二抗的最佳作用时间分别为60 min和40 min。选择无致癌的TMB为底物,确定TMB最佳反应时间为10 min。通过对20份猪阴性血清样品的检测,计算阳性判定值为0.203。通过交叉试验、批内和批问重复性试验证明,本研究建立的SaV间接ELISA检测方法具有特异性高,重复性好的特点,可用于猪沙波病毒抗体的检测。
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