【摘 要】
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目的 从肿瘤相关抗原AGR2全长氨基酸序列中选取HLA-A2.1限制性的CTL表位活性肽,并对其在体外抗肿瘤的活性进行初步研究,为临床上抗肿瘤提供一定的理论依据.方法 用量化基
【机 构】
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中国医科大学药学院,药理教研室,辽宁沈阳110122
【出 处】
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2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议
论文部分内容阅读
目的 从肿瘤相关抗原AGR2全长氨基酸序列中选取HLA-A2.1限制性的CTL表位活性肽,并对其在体外抗肿瘤的活性进行初步研究,为临床上抗肿瘤提供一定的理论依据.方法 用量化基序法和超基序法相结合的方式预测了AGR2的HLA-A2.1限制性CTL表位；采用TAP缺陷的T2细胞检测候选表位与HLA-A2.1 分子的亲和力；采用钙黄素释放实验检测AGR2特异性的CTL对肿瘤细胞的杀伤效应,筛选出能够激活CTL反应的表位；采用流式细胞术检测AGR2特异性的CTL表型；采用Elispot检测靶细胞刺激后的CTL分泌IFN-γ的水平变化.结果 采用超基序和量化基序法预测的4条HLA-A2.1限制性的AGR2表位分别为AGR-2-001、AGR-2-002、AGR-2-003和AGR-2-004；T2结合力实验发现AGR-2-001和AGR-2-002与T2结合能力和稳定性较好；钙黄素实验结果发现AGR-2-001和AGR-2-002诱导的效应细胞能够对AGR2阳性并且HLA-A2.1匹配的靶细胞产生明显的杀伤效应(p＜0.05)；表型结果检测发现AGR-2-001和AGR-2-002能诱导出AGR-2特异性的CTL,其主要为CD8+T淋巴细胞；Elispot检测发现用AGR-2+ HLA-A2+限制性的靶细胞刺激后,经AGR-2-001和AGR-2-002诱导的特异性的CTL分泌的IFN-γ水平增加(p＜0.05).结论 从肿瘤相关抗原AGR-2全长氨基酸序列中筛选出2条HLA-A2.1限制性CTL表位活性肽,AGR-2-001和AGR-2-002.
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