【摘 要】
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血蓝蛋白是存在于节肢动物和软体动物血淋巴中的含铜呼吸蛋白,近年来研究表明,血蓝蛋白是一种新的具有多种免疫防御活性的多功能蛋白.然而迄今为止,其基因转录调控机制尚不清楚.为此,本研究首先采用染色体步移技术克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vanmamei)血蓝蛋白大、小亚基5非翻译区序列,其大小分别为870、472bp,并将其命名为p870、p472,继而对所得片段进行特异性扩增、测序分析,通
【机 构】
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汕头大学理学院生物学系广东省海洋生物技术重点实验室,广东汕头515063
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血蓝蛋白是存在于节肢动物和软体动物血淋巴中的含铜呼吸蛋白,近年来研究表明,血蓝蛋白是一种新的具有多种免疫防御活性的多功能蛋白.然而迄今为止,其基因转录调控机制尚不清楚.为此,本研究首先采用染色体步移技术克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vanmamei)血蓝蛋白大、小亚基5非翻译区序列,其大小分别为870、472bp,并将其命名为p870、p472,继而对所得片段进行特异性扩增、测序分析,通过比对发现其与p870、p472相似性分别为100％、98％.生物信息学分析显示,两者均含TATA框、HSF、Dfd、CF2-Ⅱ等序列元件,提示其可能含有启动子序列.为进一步检测其是否具有启动子活性,将连接有p870的表达载体(pGL3-Basic)转染宿主细胞(果蝇S2细胞),采用荧光素酶报告基因检测试剂盒,检测报告基因活性.结果发现,实验组活性为阴性对照组的1.04倍.由此说明,我们已经成功克隆到凡纳滨对虾血蓝蛋白大、小亚基启动子序列.所获研究结果为进一步研究血蓝蛋白的基因转录表达调控机制奠定了良好的基础.
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以一种商业蝇蛆蛋白粉(经基因工程改造的家蝇蝇蛆)分别替代凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)饲料中不同比例(0％,15％,30％,45％,75％,100％)的鱼粉.以各组饲料饲养初重为2.80±0.10g的幼虾8周后,取样测定生长指标、虾体组份、肝胰腺消化酶活力,以及血细胞中锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)及血蓝蛋白(HC)的基因
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利用计算机视觉技术对三疣梭子蟹苗行为参数进行量化，得到活跃性和趋光能力参数，比较研究了不同阶段梭子蟹幼苗的行为在3个盐度水平(16、24、35)下的行为反应.结果证明，在低盐度胁迫过程中，蟹苗的活跃性和趋光能力有先增大然后再慢慢降低的趋势，在低盐度下胁迫2h后，幼苗群体活跃性和趋光能力比在正常盐度下有显著性提高(P＜0.05)，在4h后有显著性降低(P＜0.05)；在高盐度下胁迫2h后，幼苗群体活
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