【摘 要】
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目的：为了解纯化梅毒螺旋体TpF1蛋白的功能，探讨其对中性粒细胞的激活作用。方法：以Tp Nichols株基因组DNA为模板，PCR扩增TpF1基因，构建原核表达载体pET28a(+)-TpF1，并转化至宿
【机 构】
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南华大学医学院病原生物学研究所南华大学医学院实验动物部
【出 处】
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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
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目的：为了解纯化梅毒螺旋体TpF1蛋白的功能，探讨其对中性粒细胞的激活作用。方法：以Tp Nichols株基因组DNA为模板，PCR扩增TpF1基因，构建原核表达载体pET28a(+)-TpF1，并转化至宿主菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,以基因测序和Western blot分别对扩增片段和重组蛋白进行鉴定；利用化学发光法检测TpF1刺激中性粒细胞后活性氧(ROS)的产生,ELISA法检测髓过氧化物酶的释放量及IL-8的表达水平,同时设立LPS、PMA对照组。结果：基因测序比对结果显示PCR扩增的目的基因与Tp Nichols株TpFl基因完全一致。化学发光法检测ROS生成量，TpFl刺激组明显高于LPS, PMA对照组(P<0.05)，同时，ELISA检测结果显示，MPO的释放量和IL-8的表达水平均高于对照组。结论：TpF1可以激活中性粒细胞，引起ROS产生和IL-8的表达量的增高，促进MPO的释放。
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