环介导恒温扩增技术在诺沃克类病毒基因检测中的应用

• 作 者: 陈宗峰 王滔 黄祖新
• 机 构: 福建师范大学生命科学学院福建省立医院儿科研究室
• 出 处: 华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会
• 发表日期: 2008年8期
• 关键词: 诺沃克病毒 基因检测 环介导恒温扩增技术

　　目的：建立了逆转录环介导等温扩增技术快速检测诺沃克类病毒基因的方法。方法：(1)设计引物：我们分别针对GI组型，GII组型，分别采用两组组特异性引物，进行RT-LAMP反应来测验NoV基因组。(2)环介导的反转录等温扩增,建立反应体系,如下：反应缓冲液，dNTPs,简并引物；环介导的反转录等温扩增：反应混合液加入1膜板DNA，95℃水浴锅加热5分钟后，置于冰上3分钟，加入DNA聚合酶。最后，在62℃水浴锅中温育45分钟进行恒温扩增，80℃加热5分钟终止反应；琼脂糖电泳，加入Trisbuffer和EB,紫外灯下观察电泳结果。结论：用这种方法对诺沃克类病毒RNA的检测是成功的,环介导等温扩增技术是一种便捷而特异的快速基因检测技术。