枯草芽孢表面吸附固定纤维二糖差向异构酶

来源 :中国食品科学技术学会第十届年会暨第七届中美食品业高层论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guojicai
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  目的:未经重组的纯芽孢可以作为新兴的固定化载体用于吸附蛋白.本研究中,枯草芽孢杆菌的芽孢通过吸附固定来源于C.saccharolyticus的纤维二糖差向异构酶,从而提高酶的稳定性和重复使用率.方法:对芽孢吸附的条件,即酶蛋白所处介质的pH值、吸附温度和时间已经初始酶的添加量三个方面进行优化,并初步研究了固定化酶的性质及在乳果糖制备中的应用.结果与讨论:在最优的吸附条件下,即介质pH值为4.5,吸附温度4℃,时间2h,初始酶浓度2.4 mg/mL,所得固定化纤维二糖差向异构酶表观酶活为34.6 U/1011芽孢,吸附酶量为1.47 mg/1011芽孢,酶活回收率为79.4%.固定化酶的pH及温度稳定性较游离酶都有明显提高;在pH 1.0、1 mmol/LNaC1的极端条件才能将酶蛋白从芽孢表面解吸,表明酶与芽孢载体间存在强劲的作用力;连续8次使用后,固定化酶仍保持70%活力,具有较好的操作稳定性.在底物乳糖浓度为700 g/L、加酶量150 U/mL、pH 7.0、 80℃条件下反应2h,乳果糖的转化率为41.6%.
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