【摘 要】
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内毒素(Endotoxin)又名脂多糖(Lipopolysaccharide)，是革兰氏阴性菌细胞壁外膜主要成分，由类脂A、核心多糖及O-特异性多糖三部分组成，其中类脂A是活性中心，且位于内层，具有高度保守性，而多糖链位于外侧，具有多样性。有研究表明，大分子物质比小分子可能有更多的适配体结合位点。另外，固定靶标有可能会影响靶标物质的天然构象、增加空间位阻作用，从而限制了适配体在实际分析检测中的应用
【机 构】
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江南大学食品学院 江苏无锡214122 江南大学食品学院 江苏无锡214122;食品科学与技术国家
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内毒素(Endotoxin)又名脂多糖(Lipopolysaccharide)，是革兰氏阴性菌细胞壁外膜主要成分，由类脂A、核心多糖及O-特异性多糖三部分组成，其中类脂A是活性中心，且位于内层，具有高度保守性，而多糖链位于外侧，具有多样性。有研究表明，大分子物质比小分子可能有更多的适配体结合位点。另外，固定靶标有可能会影响靶标物质的天然构象、增加空间位阻作用，从而限制了适配体在实际分析检测中的应用。鉴于内毒素的特殊结构，本试验以鼠伤寒沙门氏菌内毒素为靶标，将寡核苷酸文库通过生物素-亲和素作用固定在磁珠上，并游离靶标以保持内毒素的天然构象，以鼠伤寒沙门氏菌为定向物质进行定向筛选，以BSA为反筛物质进行反向筛选，经过15轮筛选，得到一条亲和力离同时具有一定的抑制内毒素活性，且能特异性结合内毒素的适配体。本试验建立的基于固定文库定向筛选方法，避免了固定靶标对天然结构构象变化的影响，验证了定向筛选的有效性，也为今后适配体-靶标相互作用机制研究奠定了良好的基础。
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