【摘 要】
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目的 介绍SELEX技术的来源、基本原理和方法、技术特点及其在毒理学研究中的应用前景.方法 检索并综合分析近年来有关SELEX技术及其在毒理学应用方面的国外文献.结果 SELEX即指数富集的配体系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术,其基本原理是通过化学合成包含海量随机寡核苷酸序列的寡核苷酸文库
【机 构】
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南京医科大学公共卫生与热带医学学院
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目的 介绍SELEX技术的来源、基本原理和方法、技术特点及其在毒理学研究中的应用前景.方法 检索并综合分析近年来有关SELEX技术及其在毒理学应用方面的国外文献.结果 SELEX即指数富集的配体系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术,其基本原理是通过化学合成包含海量随机寡核苷酸序列的寡核苷酸文库,用待筛选靶标反复筛选与之结合的寡核苷酸序列即核酸适体(aptamer),将与靶标高效、特异结合的适体富集纯化,在较短时间内即可筛选出能与靶标特异高效结合的适体.SELEX技术主要方法流程包括：(1)合成寡核苷酸文库与靶标在20 ～ 35℃环境中孵育,使之形成适体-靶标结合物.(2)用适当的方法将未结合序列和结合物洗脱分离,提纯结合物.(3)将结合物离解,对得到的寡核苷酸库根据其类型用PCR或反转录PCR扩增.(4)重复以上步骤,经过7～15轮筛选,最后一轮可获得特异性较高的适体文库.适体具有靶标范围广、亲合力强、特异性高、制备方便等诸多优点,可在室温下长期保存及运输,具有单克隆抗体所不具备的很多优越性.SELEX技术自上世纪90年代问世后倍受重视,发展迅速,目前已广泛应用于各个生命科学领域,如基础研究、体外诊断试剂和适体治疗药物研发等,各种新型SELEX技术不断涌现,适体的靶标日益扩展,不但包括各种生物大分子如酶、细胞因子、细胞粘附分子、抗体、核酸以及病毒、细胞等,对特异性结合小分子化学物的适体研究也逐渐开展.SELEX技术已逐步应用于毒理学研究,特别是在毒品、药物、环境毒物及生物毒素的快速检测及治疗等方面进展迅速.结论SELEX技术在毒理学基础与应用研究方面前景广阔,进一步充分发挥适体技术的特点,拓展其应用范围如毒性机制研究、解毒药物研究等是主要发展方向之一,可以预计适体技术将会更加广泛深入地应用于毒理学研究.
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