丝腺特异的抑制剂serpin18具有丝素酶的抑制活性

来源 :中国蚕学会第八届青年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong518
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  Serpins (serine protease inhibitors) 是一类具有丝氨酸或半胱氨酸蛋白酶抑制活性的蛋白,这些蛋白酶抑制剂通过在不同时期和部位表达调节着靶蛋白酶的活性.我们解析了家蚕丝腺特异的抑制剂serpin18 的晶体结构,发现它除了具有保守的核心β-折叠片区域和α–螺旋区域外,还有一个特异的活性loop 区(RCL).体外活性实验显示,serpin18 对木瓜蛋白酶(半胱氨酸蛋白酶)具有明显的抑制活性,而对丝氨酸蛋白酶类却没有抑制活性.通过定点突变和酶活测定实验确定了serpin18 的识别蛋白酶的P1 残基是Val362.体外孵育实验发现serpin18 抑制木瓜蛋白酶活性时二者不会形成稳定的复合物,而是形成一个瞬时的serpin18-papain 中间态,该中间态会促使蛋白酶的自我降解,从而达到抑制蛋白酶的效果.另外,我们通过对蚕丝蛋白质组学数据分析发现了一个可以分泌到丝腺腔的半胱氨酸蛋白酶,丝素酶.对丝素酶进行天然提取后与serpin18 反应,发现其活性可以被serpin18 抑制.表达谱分析显示,丝素酶在五龄期有少量表达,预蛹期高量表达,其作用是主要参与丝素蛋白的降解.而丝腺特异的serpin18 仅在五龄的中部丝腺高量表达,育蛹期消失.这些证据表明家蚕丝腺特异的serpin18 的生理功能是调节丝素酶对丝素蛋白的降解过程.
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