【摘 要】
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Toll通路作为先天性免疫的重要信号通路,在无脊椎动物的免疫应答中起着关键作用.近年来在对虾中已经鉴定了Toll信号通路的多个基因类似物,包括Toll, Sp(a)tzle,Pelle,TRAF6,Dorsal等,但是对于Toll通路中的重要基因MyD88 (myeloid differentiation factor 88)一直未见报道.MyD88是一种重要的接头蛋白,它将Toll样受体与下游分
【机 构】
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中国科学院海洋研究所,266071
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Toll通路作为先天性免疫的重要信号通路,在无脊椎动物的免疫应答中起着关键作用.近年来在对虾中已经鉴定了Toll信号通路的多个基因类似物,包括Toll, Sp(a)tzle,Pelle,TRAF6,Dorsal等,但是对于Toll通路中的重要基因MyD88 (myeloid differentiation factor 88)一直未见报道.MyD88是一种重要的接头蛋白,它将Toll样受体与下游分子连接从而激活Toll信号通路.本研究从中国明对虾中成功获得了MyD88基因(FcMyD88)的cDNA序列,其开放阅读框(open reading fragment,ORF)全长1434bp,共编码477aa,推导的氨基酸序列包含MyD88典型的结构域：死亡结构域(death domain)、TLR结构域和TIR (IL-1R-related)结构域.序列同源性分析发现FeMyD88与之前报道的其他物种中MyD88同源性均超过48％.为了进一步研究FcMyD88与病原刺激的关系,本研究利用real-time PCR和western blot技术,分别在RNA和蛋白水平上分析了FcMyD88在鳗弧菌(G)、溶壁微球菌(G-)和白斑综合症病毒刺激后不同时间的表达变化谱.研究发现FcMyD88 mRNA在鳗弧菌和溶壁微球菌刺激后1h、12h和24h表达量上调；FcMyD88蛋白在鳗弧菌刺激后12h的表达量较对照组上调一倍,而在溶壁微球菌刺激的1-12h,FcMyD88蛋白表达量都无明显变化；白斑综合症病毒刺激对虾时,FcMyD88 mRNA表达量无明显波动,但是FcMyD88蛋白在刺激后的12h和24h表达量显著上调.以上结果提示我们MyD88依赖的信号通路可能参与了对虾抵御细菌和白斑综合症病毒的感染过程.
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