【摘 要】
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目的 探讨睡眠因子1(Slfn1)对内皮祖细胞(EPCs)粘附功能的影响。方法 实验分为空白对照组(未给予任何处理的内皮祖细胞,N-control),腺病毒阴性对照组(Ad-control组),大鼠
【机 构】
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贵州省人民医院体检中心,贵阳,550003
【出 处】
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第9届中国健康服务业大会暨中华医学会第七次全国健康管理学学术会议
论文部分内容阅读
目的 探讨睡眠因子1(Slfn1)对内皮祖细胞(EPCs)粘附功能的影响。方法 实验分为空白对照组(未给予任何处理的内皮祖细胞,N-control),腺病毒阴性对照组(Ad-control组),大鼠Slfn1腺病毒载体组(Ad-Slfn1组),发夹状RNA阴性对照组(ShRNA-control组),大鼠发夹状RNA Slfn1干扰组(ShRNA-Slfn1组)。分离培养大鼠骨髓源性EPCs,用发夹状RNA Slfn1干扰质粒、大鼠Slfn1腺病毒载体及相应的对照质粒分别转染EPCs,采用Western blot检测细胞Slfn1 及Cyclin D1表达,将EPCs接种在预先铺好纤维连接蛋白的培养板中,观察其粘附功能。用流式细胞检测仪检测细胞周期。结果 ShRNA-Slfn1组蛋白的表达明显低于ShRNA-control组,反之,Ad-Slfn1组Slfn1蛋白的表达明显高于Ad-control组,说明转染有效。用ShRNA-Slfn1减弱EPCs的Slfn1的表达明显增强EPCs的粘附能力,反之,过表达Slfn1基因则明显抑制EPCs的粘附能力。细胞周期检查结果表明,降低EPCs的Slfn1基因的表达,EPCs的细胞周期进入到S期细胞明显增多,反之,过表达Slfn1基因使EPCs的细胞周期停止在G1期。用Western blot检测各转染组的Cyclin D1表达,结果发现,ShRNA-Slfn1组Cyclin D1的蛋白表达与对照组相比,明显增高,而Ad-Slfn1组Cyclin D1的蛋白表达则明显低于对照组。结论 Slfn1通过下游靶点Cyclin D1负性调控内皮祖细胞的粘附功能。
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