鸡堆型艾美耳球虫Hsp90克隆表达及其核酸疫苗的免疫保护作用

来源 :中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zzhang123
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鸡球虫是由包括堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)在内的7种常见艾美耳球虫引起的一种寄生虫病.寄生虫侵入鸡肠道组织并分裂增殖使其发生损伤而导致腹泻、血便和体重降低,对养禽业造成严重的经济损失.基于球虫抗药性和药物残留的问题,研制安全而有效的基因工程疫苗用于鸡球虫病的防治成为热点.Hsp90家族是分子大小质量81-99Ku的一种进化保守的蛋白质,它在分子伴侣功能、细胞循环调控、抗原传递方面发挥着重要作用,已有研究表明其在多种寄生虫生长发育过程中发挥重要的作用.本研究构建pVAX-Hsp90重组真核质粒,将其在体外瞬时转染Hela细胞进行IFA检测,结果显示Hsp90可在体外成功表达,并将构建的重组真核质粒免疫雏鸡后进行攻虫保护实验,共分为4个组,未免疫未攻虫组(N组)、PBS注射攻虫组(P组)、pVAX1质粒注射组(E组)、pVAX-Hsp90免疫组(H组),实验组分别以100μL/鸡的PBS或100μg/鸡的pVAX1、pVAX-Hsp90剂量于14d和21d胸部肌肉注射免疫雏鸡,在二次免疫后每只鸡口服接种1×105孢子化卵囊,通过观察增重情况、十二指肠病变计分、OPG及抗球虫指数,对不同处理组雏鸡的各项免疫指标进行了检测,用以评价真核表达质粒的免疫效果,结果表明pVAX-Hsp90组较空载体组及PBS组增重明显(p<0.01),且肠道病变减轻,OPG减少,抗球虫指数为166.17。综上初步评价了Hsp90核酸疫苗的免疫保护作用,表明Hsp90是一种潜在的鸡球虫保护性抗原。
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