【摘 要】
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手性胺是重要的医药、精细化学品的砌块.与目前广泛用于生物催化制备手性胺的转胺酶、脂肪酶等相比较,依赖NADH 胺脱氢酶催化酮还原胺化制备手性胺具有反应路线简洁,易实
【机 构】
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厦门大学化学化工学院化学工程与生物工程系 福建厦门市思明南路422号,361005
【出 处】
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第七届中国工业生物技术发展高峰论坛
论文部分内容阅读
手性胺是重要的医药、精细化学品的砌块.与目前广泛用于生物催化制备手性胺的转胺酶、脂肪酶等相比较,依赖NADH 胺脱氢酶催化酮还原胺化制备手性胺具有反应路线简洁,易实现辅酶再生等优势.海洋环境中长期的演化过程使得海洋氧化还原酶具有与陆地酶不同的底物特异性和立体选择性,在生物催化新路线的开发中极具潜力.基于本实验室建立的海洋氧化还原酶高通量筛选平台,以催化4-甲基-2-戊酮不对称胺化和1,3-二甲基丁胺的脱氨反应进行双向筛选,从81株海洋微生物中筛选获得菌株Pseudomonaskilonensis.该菌株中依赖NADH的胺脱氢酶具有良好的催化活性和选择性,在pH 9.6 条件下催化4-甲基2-戊酮不对称还原胺化,获得R-1,3-二甲基丁胺,ee值为95％,酶活性为1.92U／mg；在pH 8.5条件下,催化脱胺反应,酶活性为2.1U／mg.研究胺脱氢酶催化酮不对称还原胺化反应的底物选择性.在支链脂肪酮、直链脂肪酮以及芳香酮中选取具有结构代表性的2-己酮、5-甲基己酮和苯乙酮为底物进行考察.催化还原胺化反应的活性分别为5.1,6.4和4.0U／mg,ee值分别为90％,92％和85％.对胺脱氢酶催化性能的研究将为最终揭示胺脱氢酶催化机制奠定基础,并为海洋氧化还原酶生物催化新途径的构建和催化效率的提升提供借鉴.
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