【摘 要】
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目的 绿茶多酚EGCG 不仅在肿瘤预防中起着重要作用,在肿瘤治疗中也有明显的辅助作用。本研究探讨EGCG 增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性,及其可能的分子机制。方法 用EGCG
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目的 绿茶多酚EGCG 不仅在肿瘤预防中起着重要作用,在肿瘤治疗中也有明显的辅助作用。本研究探讨EGCG 增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性,及其可能的分子机制。方法 用EGCG 和顺铂单独及联合作用处理卵巢癌OVCAR3 和SKOV3 细胞后,MTT 法检测细胞生存率；平板克隆形成实验观察不同处理后单个细胞的生存能力；Hoechst33258 染色检测细胞凋亡的情况；电感耦合等离子质谱分析法(ICP-MS)用于检测细胞内顺铂和顺铂-DNA 加合物的蓄积量；实时定量PCR(qPCR)检测细胞或肿瘤组织中铜离子转运蛋白mRNA 表达情况；用蛋白免疫印迹(Western Blot)检测铜离子转运蛋白在不同处理组的表达水平；通过转染si-CTR1 在卵巢癌细胞中敲减CTR1,再用顺铂处理细胞,MTT 法检测细胞生存率的变化；用卵巢癌OVCAR3 细胞构建裸鼠移植瘤模型,成瘤后腹腔注射给予EGCG 和顺铂单独及联合治疗,验证EGCG 和顺铂联合在动物体内的作用效果。结果 在卵巢癌OVCAR3 和SKOV3 细胞中,EGCG 和顺铂单独作用可抑制细胞的生存率,两者联用时作用更加明显,在卵巢癌裸鼠移植瘤模型中,两药联合处理组肿瘤体积最小；两药联合作用可明显抑制细胞生长,并可促进细胞凋亡； EGCG 和顺铂联合可使细胞内顺铂和顺铂-DNA 加合物含量分别增加；EGCG可以上调CTR1 mRNA 和蛋白水平的表达,而对其他铜离子转运蛋白的mRNA 表达没有影响；顺铂处理可诱导CTR1 的降解,而EGCG 可抑制顺铂引起的CTR1 的降解,在卵巢癌移植瘤模型中也得到同样的结论 。结论 EGCG 可上调CTR1 的表达,并抑制顺铂对CTR1 的降解,增加卵巢癌细胞对顺铂的吸收,使细胞内顺铂和顺铂-DNA 加合物的蓄积量增加,从而增加顺铂的敏感性；在卵巢癌移植瘤模型中,EGCG 和顺铂联合处理对肿瘤生长的抑制效果最明显,在肿瘤组织中CTR1 的表达变化趋势与体外实验结果 一致,提示CTR1 可能是EGCG 作为临床辅助治疗的新靶点。
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