丙型肝炎病毒F蛋白对肝癌细胞HepG2中Bcl-2和Bax表达的影响

来源 :中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wjk123465

【摘要】

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【作者】

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朱丹燕邓小昭肖雯裴家平岳明韦娟徐孝东

【机构】

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南京医科大学基础医学院南京军区疾病预防控制中心

【出处】

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

【发表日期】

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2014年8期

【关键词】

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丙型肝炎病毒1b型F蛋白 Bcl-2 Bax

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背景:本研究通过构建丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)基因1b型F基因的真核表达载体,探讨F蛋白对HepG2细胞中Bcl-2和Bax表达的影响.方法:应用聚合酶链式反应(Polymerase Chain reaction,PCR)技术扩增HCV 1b型的F基因,构建pEGFP-C3-F和pEGFP-C3-C真核表达载体,分别将pEGFP-C3-F、pEGFP-C3-C(阳性对照)和pEGFP-C3(阴性对照)瞬时转染HepG2细胞,通过荧光显微镜在自然光和蓝色激发光源下观察,在蓝色激发光源HepG2细胞中有绿色荧光,证实重组质粒已经正确转染到细胞中;转染成功后48h抽取细胞总蛋白,蛋白质印迹法(Western Blot)分别检测F蛋白、C蛋白、Bcl-2和Bax的表达并且流式细胞术分析细胞周期和凋亡率.

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