CD138 RACS结合Ⅰ-FISH和cIg-FISH技术检测多发性骨髓瘤1q21扩增的比较

来源 :中华医学第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:czw6243579
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  目的:本研究分别采用胞浆轻链免疫荧光结合FISH (cIg-FISH)技术和CD138磁珠分选(MACS)结合荧光原位杂交(I-FISH)技术对48例MM患者lq21扩增进行检测,研究多发性骨髓瘤(MM)中lq21扩增情况,对比CD138磁珠分选(MACS)结合荧光原位杂交(I-FISH)技术和胞浆轻链免疫荧光结合FISH (clg-FISH)技术的一致性,进一步探讨MM患者lq21扩增与疾病发展及预后之间的相关性。
  方法:1.研究对象:收集48例MM患者标本,疾病诊断及分期参照张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》(第三版)。2.CD138 MACS结合I-FISH。3.clg-FISH。4.图像采集与分析。5.统计分析。
  结果:1.分组:我们将实验结果分为两组:出现lq21扩增定义为阳性组;未出现扩增定义为阴性组(包括缺失、正常)。辨别浆细胞:骨髓瘤细胞的胞浆经κ或λ染色后,胞浆染为蓝色,非瘤细胞胞浆不着色。2.cIg-FISH:阳性组死亡率明显高于阴性组(P<0.05),两组患者在性别、年龄、D-S分期、ISS分期、分组和β2-MG含量均无统计学差异(P>0.05)。3.CD138 MACS结合I-FISH:阳性组死亡率明显高于阴性组(P<0.05),两组患者在性别、年龄、D-S分期、ISS分期、分组β2-MG含量均无统计学差异(P>0.05)。4.CD138MACS分选结合I-FISH与clg-FISH两种技术检测lq21扩增结果比较:对比两种检测方法阳性率,差异无统计学意义(P>0.05)。本实验证实CD138MACS分选结合I-FISH敏感性高于cIg-FISH。即CD138MACS分选结合I-FISH在检测骨髓浆细胞较低的患者时灵敏度较高。
  结论:间期F-ISH技术可利用位点特异性探针检测间期细胞中的核型异常。采用CD138磁珠分选(MACS)富积骨髓瘤细胞结合间期FISH对MM核型异常进行检测,二者结合大大提高了MM核型异常的检出率。但磁珠筛选需要特殊的分选设备,分选成本较高,且费时费力;另一方面由于骨髓的稀释和在筛选过程中的损失,导致分选效率较低,影响实验的正常进行,同时对标本需要量较多。胞浆轻链免疫荧光结合FISH( clg-FISH)技术,与传统FISH相比无需进行磁珠分选,利用单个核细胞滴片后直接与探针杂交,实验时间较短,费用较低,需要采集的骨髓标本量较少,易于标本的收集。仅需要了解患者的轻链类型,以便选择正确的抗体即可。本研究说明这两种检测方法一致性较好,可以互相替代,这样有利于部分骨髓不易收集患者的核型检测,扩大选择范围,同时节省费用。我们实验结果进一步显示5例CD138MACS分选结合I-FISH技术检测阳性者,采用clg-FISH检测呈现阴性,并且这5例患者的骨髓浆细胞比例明显低于其他26例两种检测方法共阳性的患者(P<0.05)。说明当患者骨髓浆细胞比例较低时CD138MACS分选结合I-FISH技术较clg-FISH技术更灵敏(P<0.05)。因此,对于骨髓浆细胞比例低的患者采用CD138MACS分选结合I-FISH技术更为妥当。对于l号染色体异常的研究有助于揭示MM患者疾病的临床进展及预后机制,从而找到相应的治疗手段。本实验采用两种方法检测lq21扩增阳性率均高于Arkansas研究小组和Mayo研究小组的结果30%-40%。推测亚洲人种lq21扩增率较高。本实验研究发现lq21的扩增与患者性别、年龄、D-S分期、ISS分期、分组、B 2-MG含量无显著的统计学意义。但伴有Iq21扩增阳性组患者死亡率明显高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05),说明存在lq21扩增的患者有较高的死亡风险,从另一个侧面证实了lq21扩增是MM患者预后差的重要指标之一,可以通过监测其表达情况来判断疾病的进展及疗效的情况。
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