【摘 要】
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目的：探讨一种快速、准确检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)革兰阴性菌的ESBLs基因分型方法。方法：双纸片法确定产ESBLs的临床分离菌,聚合酶链反应(PCR)法扩增ESBLs的SHV基因
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院药理教研室,四川 成都 610041
【出 处】
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四川省生理科学会第十届代表大会暨学术交流会
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目的：探讨一种快速、准确检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)革兰阴性菌的ESBLs基因分型方法。方法：双纸片法确定产ESBLs的临床分离菌,聚合酶链反应(PCR)法扩增ESBLs的SHV基因片段,用焦磷酸测序法对29株成都市区临床分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行SHV基因分型研究,检测SHV基因片段中编码35位氨基酸和编码43位氨基酸位点的基因多态性.同时,采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验。结果：焦磷酸测序发现,本地区分离出的29株产ESBLs临床分离菌有21株扩增出SHV基因片段,且在43位氨基酸密码子均没有多态性,35位密码子有基因多态性,核苷酸由T突变为A,亮氨酸变为谷氨酰胺,突变发生率达到43％(9／21).29株产ESBLs的菌株对亚胺培南全部敏感；对头孢西丁,头孢吡肟,头孢他啶耐药率分别为：大肠埃希氏菌29.4％、11.8％、41.2％；肺炎克雷伯菌50％、8.3％、33.3％；对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑林、头孢呋辛、左氧氟沙星和复方新诺明的耐药性较高,均达到75％以上,对其它药物均有不同程度的耐药性。结论：焦磷酸测序技术可快速对临床分离菌产生的ESBLs的耐药基因分型,具有准确、快速、实时和高通量等优点。
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