【摘 要】
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[目的]初步探讨miR-702-3p在纳米二氧化硅致大鼠肺纤维化中的生物学作用.[方法]在本课题组前期纳米二氧化硅经气管一次性灌注染尘大鼠实验中,经高通量测序筛选出肺组织差
【机 构】
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东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
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[目的]初步探讨miR-702-3p在纳米二氧化硅致大鼠肺纤维化中的生物学作用.[方法]在本课题组前期纳米二氧化硅经气管一次性灌注染尘大鼠实验中,经高通量测序筛选出肺组织差异表达上调miR-702-3p的基础上,运用在线数据库Targetscan.org对miR-702-3p调控的靶基因进行预测；采用基因本体论分析(the Gene Ontology)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分别对预测靶基因进行功能显著性富集分析和信号通路分析,结合NCBI等文献检索方法筛选出与肺纤维化相关的靶基因,选择预测靶基因骨形态发生蛋白-7 (BMP-7)做进一步研究分析；采用Real-time PCR相对定量法检测实验组(经气管一次性灌注12.5 mg/ml纳米二氧化硅悬浮液1ml染尘60天)和对照组(气管灌注生理盐水)大鼠肺组织样本中miR-702-3p的表达水平；采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测实验组和对照组中靶蛋白BMP-7的表达水平(内参为GADPH).[结果]预测miR-702-3p可能调控的下游靶基因共计136个；miR-702-3p参与调控的与肺纤维化相关的生物学功能涉及肺间质细胞增殖、TGF-β信号途径、结缔组织形成、Smad蛋白信号转导、胶原蛋白代谢调控、Wnt受体信号通路等； 实验组与对照组大鼠肺组织miR-702-3p的表达量2-AACt值分别为2.72±0.25、1.0±0.14,与高通量测序的结果一致；实验组与对照组大鼠肺组织中BMP7蛋白的相对表达量(BMP7蛋白条带灰度值与内参GADPH比值)分别为0.90±0.08、1.51±0.36,差异有统计学意义(p＜0.05).[结论]纳米二氧化硅致肺纤维化的发生与miR-702-3p相关,其可能通过对BMP-7等靶基因的调控在肺纤维化中发挥作用.
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