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本试验旨在探讨纳豆芽孢杆菌B4对体外小鼠巨噬细胞活力与功能的影响.RAW264.7小鼠单核巨噬细胞(1×106个/ml)按每孔1ml接种6孔培养板,37℃、5% CO2培养48h后,处理组每孔加入1ml芽孢杆菌B4芽孢悬液(1×10s个/ml),对照组加入等体积培养基,37℃、5% CO2继续培养12h.试验结束后,收集样品并测定指标:(1)台盼蓝拒染法测定巨噬细胞活力;(2)收集培养上清,测定其中LDH活力与NO、细胞因子(TNF-α,IFN-γ,IL-1β,IL-6,IL-8,IL-12,IL-10)水平;(3)加入0.1% Triton X-100裂解细胞并收集细胞裂解液,测定其中ACP、LDH和iNOS活力.结果显示:(1)处理组与对照组的巨噬细胞活力与胞外LDH活力均不存在显著差异(P>0.05),且两组的细胞活力均高于97%,表明纳豆芽孢杆菌B4对小鼠巨噬细胞没有明显的细胞毒性.(2)与对照组相比,处理组巨噬细胞ACP与LDH活力分别极显著升高330.68%(P<0.01)与31.91% (P<0.01),表明纳豆芽孢杆菌B4能够显著激活小鼠巨噬细胞.(3)处理组巨噬细胞iNOS活力与NO水平分别比对照组提高了31.69% (P <0.01)与32.97% (P<0.01),表明纳豆芽孢杆菌B4能够通过显著增强iNOS活力,诱导小鼠巨噬细胞产生NO.(4)与对照组相比,处理组TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12与IL-10水平均极显著增加761.64% (P<0.01)、108.95% (P<0.01)、无限(P<0.01)、79.52% (P <0.01)、286.69% (P<0.01)、无限(P<0.01)和572.08% (P <0.01),表明纳豆芽孢杆菌B4能够显著诱导小鼠巨噬细胞产生促炎和抑炎因子,从而提高其炎症反应.结果提示,纳豆芽孢杆菌B4并未对巨噬细胞造成损伤,因而具有很好的安全性,同时,其一方面能够通过激活巨噬细胞提高其吞噬活性,另一方面可以通过诱导NO与细胞因子产生提高小鼠巨噬细胞的免疫功能,因此,纳豆芽孢杆菌B4可作为一种具有免疫调节活性的益生菌.