【摘 要】
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Ca2+跨膜吸收是动物胃肠道内食糜钙吸收的重要形式.通常认为,CaBP-D9k、TRPV6、VDR是调控Ca2吸收的主要限速大分子,在钙代谢特征的不同动物内有不同的时空表达特征.本试
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵阳550025
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会
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Ca2+跨膜吸收是动物胃肠道内食糜钙吸收的重要形式.通常认为,CaBP-D9k、TRPV6、VDR是调控Ca2吸收的主要限速大分子,在钙代谢特征的不同动物内有不同的时空表达特征.本试验采用Real-Time PCR法测定鼠胃肠道CaBP-D9k、TRPV6、VDR mRNA表达水平,为动物胃肠道Ca2+跨膜吸收动力学研究提供基础.将12只昆明小鼠(8周)处死,快速分离胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠,应用Real-time PCR技术检测其CaBP-D9k、TRPV6、VDR mRNA表达丰度.设定胃为对照组织样本,以β-actin作内参基因,用2-△△Ct法分析上述基因在胃肠道内的相对表达水平.结果表明,在胃肠道各片段均能检测到3种基因;CaBP-D9k、TRPV6、VDR、β-actin的标准曲线相关系数分别为0.995 3、0.998 5、0.997 3,融解曲线均为单一峰;扩增产物与目的基因相符.CaBP-D9K、TRPV6、VDR mRNA在胃内均属低水平表达,而在盲肠的表达水平最高(P <0.000 1);在小肠肠段内(十二指肠、空肠、回肠),CaBP-D9k (P<0.000 1)、VDR mRNA (P<0.05)表达水平均随着消化道的延伸而显著降低;回肠内TRPV6mRNA高水平表达;在大肠肠段内(盲肠、结肠),CaBP-D9k(P<0.000 1)、VDR (P<0.05) mRNA的表达丰度亦随着食糜流经顺序的延伸而显著渐降.结果提示,本研究从转录水平上检测了Ca2+跨膜吸收过程限速大分子CaBP-D9k、VDR、TRPV6在胃肠道不同片段的表达特征,结果显示,这3个基因在胃肠道不同片段内的分布与这些位点的钙吸收特征密切相关.试验结果,可推进Ca2跨膜吸收动力学参数及动物胃肠道钙吸收模式的研究.
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