【摘 要】
：
目的 了解低剂量镉(Cd)长期暴露对人B淋巴母细胞(HMy2.CIR)增殖的影响,并探讨周期抑制基因p16基因及DNA甲基化在其中的作用.方法 以CdCl2 0,0.005, 0.01和0.1 μmol· L-1处理HMy2.CIR细胞,短期组Cd处理48 h,长期组Cd处理3个月(3 m).采用细胞计数法检测HMy2.CIR细胞增殖情况；以real-time RT-PCR法检测DNMT1,DNM
【机 构】
：
复旦大学放射医学研究所,上海200032
论文部分内容阅读
目的 了解低剂量镉(Cd)长期暴露对人B淋巴母细胞(HMy2.CIR)增殖的影响,并探讨周期抑制基因p16基因及DNA甲基化在其中的作用.方法 以CdCl2 0,0.005, 0.01和0.1 μmol· L-1处理HMy2.CIR细胞,短期组Cd处理48 h,长期组Cd处理3个月(3 m).采用细胞计数法检测HMy2.CIR细胞增殖情况；以real-time RT-PCR法检测DNMT1,DNMT3b和p16等基因表达；用胞嘧啶延伸实验检测细胞全基因组甲基化状态；用微核形成实验检测细胞损伤；用甲基化特异性PCR (MSP)法检测p16基因启动子的甲基化状态.结果 低剂量Cd短期暴露可以明显促进HMy2.CIR细胞增殖,而低剂量Cd长期暴露促进细胞增殖的作用更加显著.Real-time RT-PCR检测长期低剂量Cd暴露细胞发现DNA甲基转移酶DNMT1和DNMT3b表达升高,而周期抑制基因p16表达下降.长期低剂量Cd暴露后全基因组发生高甲基化,且p16基因启动子也发生高甲基化改变.此外,用5-aza-dC处理低剂量Cd长期暴露细胞可以显著降低细胞增殖并恢复p16基因的表达.结论 低剂量长期暴露Cd诱导周期抑制基因p16启动子高甲基化而抑制该基因的表达,并诱导HMy2.CIR细胞增殖加快,这可能是Cd致细胞恶性转化的分子机制之一.
其他文献
目的 研究氟化钠对雌性小鼠生殖功能及对子代行为的影响.方法 成年健康雌性小鼠随机分为对照组(蒸馏水),氟化钠10,20和40 mg· kg-1组,测量雌性小鼠孕前体重增长量、动情周期、孕后母鼠增重、子宫重、胎盘重,胎仔存活情况.选择同一天出生哺乳25 d的仔鼠,每组5只.通过旷场实验检测仔鼠行为学改变.结果 氟化钠引起雌性小鼠动情期缩短、胎盘重量增加、活胎数减少(P＜0.05)；旷场实验中氟化钠能
目的 本研究通过青春期前较高浓度的双酚A(BPA)短期暴露,探讨其对卵泡生长发育的影响及其可能机制.方法 28日龄雌性Wistar大鼠腹腔注射BPA 10,40和160 mg· kg-1,对照组注射等容量的橄榄油,每天染毒1次,连续染毒1周.通过检测卵巢重量、各级卵泡构成、血清性激素水平来评估对卵巢结构和功能的影响；用实时荧光定量PCR分析检测卵泡发育相关基因基础螺旋环转录因子(FIGLA)、卵母
目的 研究雌性小鼠断乳后暴露大豆异黄酮对卵巢发育的影响,为探讨大豆异黄酮对卵巢早期发育的干扰作用提供依据.方法 刚断乳雌性ICR小鼠,按体质量随机分为大豆异黄酮0,50,100和200mg· kg-组,每日1次,持续5周.干预结束后测定实验前后体重变化、观察阴门开放时间、计算卵巢脏器系数及各级卵泡构成比改变.结果 低剂量组、中剂量组和高剂量组实验前后体重增加值低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0
目的 探讨双酚A(BPA)影响卵泡发育相关基因的表观遗传学调控机制,为进一步阐明BPA的雌性生殖毒性机制提供依据.方法 28日龄雌性Wistar大鼠腹腔注射BPA 10,40,160 mg·kg-1,对照组注射等容量的橄榄油,每天染毒1次,连续染毒1周.用实时荧光定量PCR分析检测Kitlg基因mRNA的表达水平,用Western blot和免疫组化法检测上述蛋白的表达水平.采用亚硫酸氢盐修饰后测
目的 观察RATOS是否对大鼠的配子成熟度、交配行为、生育力、胚胎着床前阶段和着床的生殖能力及生殖系统产生影响,为评价RATOS的安全性提供依据.方法 SD大鼠灌胃给RATOS 100,300和900 mg· kg-1,给药量为1 ml·100 g-1.交配前雄鼠连续给药28 d,雌鼠连续给药14d,雌雄按1∶1同笼交配,交配期继续给药至交配成功,雌鼠交配成功后仍继续给药至受孕第6天.观察指标包括
目的 探讨亚砷酸钠诱导上皮-间质转化(EMT)过程中肿瘤干细胞(TSC)特性获得在亚砷酸钠(NaAsO2)所致人皮肤角质(HaCaT)细胞恶性转化过程中的作用及其分子机制,为寻找砷化物致癌的早期生物学标志及发现新的防治措施提供新的线索.方法 应用显微镜检测细胞形态；软琼脂集落形成实验和裸鼠致瘤实验检测细胞检测细胞恶性程度和致瘤性；实时荧光定量PCR和Western blot分别检测不同恶性程度Ha
目的 探索基因多态性与燃煤型砷中毒发病风险的关系及DNA甲基化在砷致病致癌中的作用.方法 选择贵州省兴仁县燃煤型砷中毒病区砷中毒患者为病例组,以12 km以外某村经健康体检合格的居民为对照组；病例组自愿手术者依据皮肤病理诊断分为癌变组和非癌变组.知情同意原则下采集研究对象血液样本,提取DNA；应用PCR-RFLP和测序法检测分析其代谢酶基因(GSTM1,GSTT1,GSTP1,GSTO1)、DNA
Consumption of drinking water contaminated with arsenic, a natural and carcinogenic metalloid, constitutes a global public health problem.The lack of knowledge regarding the carcinogenic mechanism of
目的 本研究拟补充乙醇胺的遗传毒理学资料,为完善其安全性评价提供帮助.方法 采用鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames试验),小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试.Ames试验采用鼠伤寒沙门菌突变菌株TA97,TA98,TA100和TA102,使用标准平皿掺入法,分别在加与不加大鼠肝S9系统的条件下进行试验,观察自发回复突变数.Ames试验设5个剂量组0.08,0.4,2.0,1
目的 拟补充和验证丙烯酸-2-乙基己酯(2-EHA)的遗传毒性数据,为其安全性评价提供资料.方法 采用三种致突变试验：鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames试验),小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试.Ames试验采用鼠伤寒沙门菌突变菌株TA97,TA98,TA100和TA102,使用标准平皿掺入法,分别在加与不加大鼠肝S9系统的条件下进行试验,观察自发回复突变数.Ames试验设