突变体CYP119T213G催化苯乙烯不对称环氧化反应研究

来源 :中国化学会第29届学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhoulinqin274385037
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  细胞色素 P450 单氧化酶 CYP 119 为最早发现的耐热酶之一,在药物和精细化学品中间体合成中具有较好的应用前景[1].目前研究的 CYP 119 酶催化环氧化和羟基化反应的底物主要是苯乙烯类似物和饱和脂肪酸如月桂酸等.Montellano 等报道了野生型 CYP 119 酶在常温下催化苯乙烯环氧化反应催化速率为 0.6 nmolmin-1nmol-1,生成的 S 和 R 构型环氧化产物比例为 3:1[2];Niemeyer 等报道野生型 CYP 119 酶在高温条件(70℃)下可提高该催化速率到 78.2 min-1,生成的 S 和 R 构型环氧化产物比例下降为 2:1[3].我们通过蛋白工程如定点突变和定向进化等技术获得了系列 CYP 119 突变体,发现突变体 CYP 119 T213G 在 70℃下可提高苯乙烯环氧化反应催化速率为 346.2 min-1,S 和 R 构型环氧化产物比例为 3.7:1,在 35℃下催化速率为51.2 min-1,S 和 R 构型环氧化产物比例为 4.9:1;研究结果提示突变体 CYP 119 T213G 对苯乙烯底物的空间位阻和相互作用能可能是这个不对称环氧化反应的催化速率和对映选择性改善的主要原因[4].
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