【摘 要】
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褐藻胶寡糖因其内在的生物功能具有良好的应用前景,褐藻胶裂解酶可将褐藻胶降解为褐藻胶糖,因此提高褐藻胶裂解酶活性是人们研究的热点.鲍鱼肝胰腺中的褐藻胶裂解酶基因
【机 构】
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上海海洋大学食品学院,上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海201306
【出 处】
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2015中国(上海)食品产业发展论坛暨上海市食品学会学术年会
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褐藻胶寡糖因其内在的生物功能具有良好的应用前景,褐藻胶裂解酶可将褐藻胶降解为褐藻胶糖,因此提高褐藻胶裂解酶活性是人们研究的热点.鲍鱼肝胰腺中的褐藻胶裂解酶基因构建到pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL21菌株中诱导表达的包涵体进行变性、复性及组氨酸亲和层析纯化.继而对纯化得到的褐藻胶裂解酶蛋白进行酶学特性研究.细胞破碎物酶活检测及SDS-PAGE分析表明,重组蛋白为包涵体,相对分子量约为32 kDa.包涵体纯化、复性后的酶活为15.6 U/mL.纯化后的工程酶酶学性质研究表明：该酶最适温度35℃；最适pH值为8.0；只能降解多聚甘露糖醛酸(polyM)而不能降解多聚古洛糖醛酸(polyG)；催化褐藻胶的Km值为1.71 mg/mL,Vmax为19.08 U/mL.
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