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目的:分析临床分离红霉素耐药的肠球菌携带ermB、mefA基因与携带转座子Tn1545和Tn917之关系,证实肠球菌红霉素耐药性、耐药基因及转座子在同种同属、同种不同属和异种细菌之间的传递。
方法:采用琼脂稀释法进行细菌红霉素最低抑菌浓度(MIC)的测定,用聚合酶链反应(PCR)及测序检测肠球菌ermB基因、mefA基因、Tn1545和Tn917,用ERIC对进行接合试验的30株肠球菌进行基因分型,通过滤膜接合法对耐红霉素的肠球菌进行质粒接合转移试验。
结果:158株儿童临床标本分离的肠球菌,红霉素MIC50和MIC90为256ug/ml,红霉素耐药率为94.9％(150株/158株)。在150株红霉素耐药株中,ermB基因的总携带率为70.7％,粪肠球菌ermB基因的携带率高于屎肠球菌(P=0.009);粪肠球菌未检测到mefA基因,只有一株屎肠球菌检测到mefA基因。106株ermB基因阳性红霉素耐药株中,ermB基因有46.2％的菌株同时存在于转座子Tn1545和Tn917;单纯存在于转座子Tn1545的43株,占40.6％;单纯存在于转座子Tn917的1株,占0.9％。粪肠球菌之间的质粒接合转移试验结果:13株接合子,红霉素MIC≥512ug/ml,除原供体菌一株粪肠球菌阴性外,其余的12株接合子全部携带ermB基因,ermB基因全部同时存在于转座子Tn1545和Tn917;屎肠球菌、海氏肠球菌与粪肠球菌之间的质粒接合转移试验结果:17株接合子,红霉素MIC≥512ug/ml,除原供体菌一株屎肠球菌阴性外,其余的16株接合子携带ermB基因,ermB基因有11株同时存在于Tn1545和Tn917,4株仅存在于Tn1545,1株仅存在于在Tn917;肠球菌和金黄色葡萄球菌之间的质粒接合转移试验结果:30株金黄色葡萄球菌接合子,红霉素MIC≥512ug/ml,除原供体菌一株粪肠球菌和一株屎肠球菌阴性外,其余的28株接合子全部携带ermB基因,其中ermB基因有23株同时存在于Tn1545和Tn917,4株仅存在于Tn1545,1株仅存在于Tn917。
结论:儿科肠球菌分离株红霉素耐药主要机制是ermB基因编码的23SrRNA甲基化酶致靶位改变,Tn1545和Tn917基因与ermB基因存在密切相关,肠球菌红霉素的耐药性既可以在同种同属、同种不同属和异种之间进行传递。