【摘 要】
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目的:口腔鳞状细胞癌是口腔最常见的恶性肿瘤，在发展中国家的发病率较高，且预后较差，急需探索新的治疗手段以提高患者的存活率。本研究旨在探寻口腔鳞癌基因治疗的潜在靶点，采用
【出 处】
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2013国际暨全国第十二届头颈肿瘤学术大会
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目的:口腔鳞状细胞癌是口腔最常见的恶性肿瘤，在发展中国家的发病率较高，且预后较差，急需探索新的治疗手段以提高患者的存活率。本研究旨在探寻口腔鳞癌基因治疗的潜在靶点，采用功能失活突变的手段，探讨NLK用于口腔鳞癌基因治疗的可能性。通过将表达上述短发夹RNA(shRNA)的慢病毒颗粒感染人口腔鳞癌CAL-27细胞，对上述基因进行沉默，观察其对细胞生长、克隆形成和细胞周期调控的影响，阐明其在口腔鳞癌恶性生长中的调节功能。
方法:将慢病毒颗粒感染口腔鳞癌细胞CAL-27后，通过实时荧光定量PCR和Western blot实验在mRNA和蛋白水平验证靶基因的敲减效率。应用MTT、平板克隆形成实验观察靶基因的表达抑制对于肿瘤细胞恶性增殖能力的影响，PI染色流式细胞术检测靶基因沉默后细胞周期分布的变化，从而明确靶基因在口腔鳞癌细胞恶性生长中的生物学功能。
结果:表达靶基因shRNA的重组慢病毒可高效感染CAL-27细胞，并沉默靶基因的表达。该口腔鳞癌细胞可作为稳定沉默靶基因的模型细胞，进行后续功能试验o MTT、克隆形成和流式细胞检测结果显示靶基因沉默后，口腔鳞癌细胞的增殖能力显著减弱，克隆性生长能力显著降低，并使细胞周期分布发生显著改变。
结论:慢病毒介导的shRNA能有效沉默口腔鳞癌细胞中NLK基因的表达，同时显著抑制细胞的增殖能力并影响细胞周期分布。慢病毒介导的NLK基因沉默是口腔鳞癌潜在的临床非手术治疗方式。NLK基因有望作为基因治疗的分子靶标用于口腔鳞癌的临床诊断和靶向治疗。
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